微生物--遗传与变异2.pptVIP

第二节 基因突变和诱变育种;一、基因突变（gene mutation）;表型;突变株的表型;突变率;突变一般是独立发生的。;5、可诱变性;（四）基因突变自发性和不对应性的实验证明;变量实验（fluctuation analysis）Salvador Luria and Max Delbruck（1943）;影印实验（replica plating ）Joshua Lederberg and Esther Lederberg（1952）;仅影响一对碱基;1 自发突变（spontaneous mutation）;自发突变的原因;　　诱发突变简称诱变，是指通过人为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。;(1)碱基的置换（substitution）;碱基的置换;置换的机制;② 间接引起置换的诱变剂;它们的作用是通过活细胞的代谢活动掺入到DNA分子中 后而引起的，故是间接的。;(2)移码突变（frame-shift mutation，phase-shift mutation）; 由移码突变所产生的突变株，称为移码突变株（frame-shift mutant）。;(3)染色体畸变（chromosomal aberration）;DNA的大损伤（macrolesion）;DNA序列通过非同源重组的方式， 从染色体某一部位转移到 同一染色体上另一部位 或其他染色体上某一部位的现象， 称为转座（transposition）。; 凡具有转座作用的一段DNA序列，称转座因子 （transposible element，TE），又称跳跃基因 （jumping gene）、可移动基因（moveable gene）、 可移动遗传因子（mobile genetic element）。;转座因子;进化研究 抗药性产生机制 各种研究用的突变株的获得;转座因子的特点;（六）紫外线对DNA的损伤及其修复; 把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下时，可明显降低其死亡率的现象，称为光复活作用。;2.切除修复（excision repair）; 二、突变与育种 （一）自发突变与育种 （breeding by spontaneous mutation） 1. 从生产中育种;2. 定向培育优良菌株;（二）诱变育种（breeding by induced mutation）;筛选;可获得供工业和实验室应用的各种菌株； 提高有用代谢产物的产量； 减少杂质、提高产品质量、扩大品种和简化工艺等。;诱变育种的特点; 诱变育种的工作程序;诱变育种的基本原则：;诱变育种应注意的几个问题;2. 诱变因素剂量的选择;3. 出发菌株的选择; 1. 抗性突变株的筛选 （1）抗终代谢物结构类似物的突变株 用途：筛选相应代谢物的高产菌株 （2）抗药性突变株 用途：筛选相应药物(抗生素) 的高产菌株或遗传标记制作 ;筛选的方法--- 梯度平板法; 异烟肼（“雷米封”）是吡哆醇的结构类似物，利用含异烟肼梯度平板筛选异烟肼抗性突变株，可达到定向培育吡哆醇高产突变株的目的。 所谓结构类似物（又称代谢拮抗物）是指那些在结构上和代谢终产物（氨基酸、嘌呤、维生素等）相似的物质。 ;2、营养缺陷型突变株的筛选;（2）与营养缺陷型突变有关的3类遗传型个体;（3）筛选步骤（5步）;淘汰野生型;营养缺陷型的检出;影印平板法;营养缺陷型的鉴定; a. 不含维生素的酪素水解液或氨基酸混合液 b. 维生素混合液 c. 0.1%碱水解酵母核酸液;以氨基酸缺陷为例进行说明 将18种氨基酸按右表分为6组 特点：每2组只有一种共同物质;（3）营养缺陷型的用途 生产菌 (氨基酸、核苷酸、维生素等高产菌需求) 研究代谢途径和杂交、转化等遗传规律的遗传标记 ;本节小结;1. 营养缺陷型（auxotroph） ;营养缺陷型突变株 在遗传学、分子生物学、遗传育种和遗传工程等研究中 ——十分重要;营养缺陷型的表示方法：;hisC－;2. 抗性突变型（resistant mutant）;特 点：;表示方法：;抗性突变???株 在遗传学、分子生物学、遗传育种和遗传工程等研究中 ——极为重要;3. 条件致死突变型（conditional lethal mutant）;在25℃下可感染其E. coli宿主 在37℃却不能感染;产生Ts突变的原因;4. 形态突变型（morphological mutant）;特点：;举例：;平板法的优点： 快速简便，工作量小，结果直观性强（例如可用上述变色圈、透明圈、抑制圈、生长圈或沉淀圈等方法测定某代谢产物的量）；