用二种方法检测乙肝病毒表面标志物结果分析.docVIP

精品论文 参考文献 用二种方法检测乙肝病毒表面标志物结果分析 刘萍1 刘平2 吴祥如3（ 1 安徽医学高等专科学校 2 3 0 0 6 1 ）（ 2 合肥工业大学医院 2 3 0 0 0 9 ）（ 3 安徽省立友谊医院 2 3 0 0 4 1 ） 【摘要】目的: 比较胶体金法与酶联免疫法(ELISA ) 检测乙型肝炎病毒(HBV) 表面标志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc，以下简称乙肝两对半）的结果，探讨这二种方法的符合率。方法: 分别用酶联免疫法和胶体金法检测200 例成人血清标本乙肝两对半，将两种检测结果进行分析、比较。结果:200 例标本中，ELISA 法和胶体金法检测 HBsAg 结果差异无统计学意义(P ＞ 0.05)，两法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 总符合率分别为100%、100%、100%、98.00%、99.00%；结论: ELISA 法灵敏度高，易观察，适合大规模标本的测定。胶体金法简便快速，特异性较高，不需要特殊设备，易于观察结果，但存在一定假阳性或假阴性率，不能完全替代ELISA 法进行乙肝病毒血清标志物的检测，适合在基层医疗单位、急诊标本和单份标本初筛时使用。 【关键词】酶联免疫法(ELISA) 胶体金法 乙肝两对半 据世界卫生组织报道，全球约20 亿人曾感染过HBV，其中3.5 亿人为慢性HBV 感染者，每年约有100 万人死于HBV 感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。据估计，全世界现有乙肝病毒携带者3.6 亿，其中我国约有1.3 亿。乙型肝炎的流行不仅影响人们的健康，也给社会带来沉重的经济负担。随着人们健康意识的增强，乙型两对半检测已成为人们的日常体检、门诊常规检查项目。目前最常用的是用ELISA 法检测乙肝两对半，ELISA 法由于具有较高的灵敏度和特异性，且容易开展，因而成为实验室普遍使用的方法，但检测时间长，操作较繁琐，不便单个标本快速检测。胶体金法是近年来开展的一种快速检测方法，其操作简便，不需要特殊设备和条件，可在基层医疗单位开展，目前也常应用于门诊体检和急诊患者的单个标本检测等。现用ELISA 法和胶体金法对200 名成人血清进行乙肝两对半检测，并对结果进行分析比较，以探讨这二种方法的符合程度。 1 对象与方法 1.1 对象 收集2011 年省友谊医院健康体检者，共200 例标本，其中男性108 例, 女性92 例，年龄最大60 岁，最小21 岁，进行乙肝两对半检测。每人采集空腹静脉血3ml，3000r/min 离心，吸取上层血清待检。 1.2 试剂 采用E L I S A 法检测乙肝两对半，试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供，严格按照检测试剂说明书和操作规程操作，每次操作均同时做质控对照。 胶体金法：将测试卡和血清标本恢复至室温，用吸管吸取待测血清50mu;l。 （约1 ～ 2 滴），滴于测试卡加样端，在室温下15 ～ 20 分钟内判断结果。胶体金测试卡由广州万孚生物技术有限公司提供，均在有效期内使用。 1.3 方法 ELISA 所有标本均用SM - 3 型自动酶联免疫系统分析仪检测，HBsAg、HBsAb、HBeAg 样本OD 值S/CO ge; 1 为阳性，反之为阴性；HBeAb、HBcAb 样本OD 值S/CO ge; 1 为阴性，反之为阳性。 胶体金测试卡采用免疫层析法，其中HBsAg、HBeAg 采用双抗体夹心法，HBsAb 采用双抗原夹心法，HBeAb、HBcAb 采用竞争抑制法，按说明书要求操作。阳性结果判断HbsAg、HBsAb、HbeAg 测试卡分别出现检测线和质控线，HBeAb、HbcAb 测试卡的试纸条只出现质控线，测试卡未出现质控线为失效。 1.4 结果判断 ELISA 法的HBsAg、HBeAg 阳性判断标准：样品OD 值ge;临界值者判为阳性，HBsAg 阴性判断标准：样品OD 值＜临界值者判为阴性；抗-HBs、抗- HBe、抗- HBc 阳性判断标准：样品A 值＞临界值者判为阳性，阴性判断标准：样品A 值＜临界值者判为阴性。 胶体金法的阳性判断标准: 在测试区和质控区内各出现一条红色条带；阴性判断标准：仅在质控区出现一条红色条带，在测试区内无红色条带出现；若质控区内未出现红色条带，检测无效。 1.5 统计处理 两种检测方法的数据采用定性实验方法比较表进行分析[1], 用卡方检验两种方法检测结果。 2 结果