电刺激家兔腹侧脑桥A5区对呼吸的影响.docVIP

精品论文 参考文献 电刺激家兔腹侧脑桥A5区对呼吸的影响 张明华 李艳春（山东医学高等专科学校 山东济南 250002） 【中图分类号】R741.049【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）27-0068-02 【摘要】目的 观察腹侧脑桥A5区对呼吸的影响。方法 电刺激家兔的腹侧脑桥A5区，向腹侧脑桥A5区注射L-谷氨酸钠，以膈神经放电为指标分别观察对呼吸的影响。结果 ①电刺激家兔腹侧脑桥A5区，膈神经呼气相明显延长，呼吸频率降低，而且刺激强度越大呼气相延长越明显。②向腹侧脑桥A5区内注射L-谷氨酸钠，呼气延长，且不影响吸气时间。结论 电刺激腹侧脑桥A5区可使呼气延长，该区内的N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体参与了呼气延长。腹侧脑桥在呼吸节律的调整中起重要作用。 【关键词】腹侧脑桥 电刺激 家兔 脑桥分为背侧脑桥和腹侧脑桥，背侧脑桥的主要结构即KF核及臂旁内侧核（Parabrachial Nuclei）。按照Flack等[1]的方法，在大鼠中枢神经系统内包含有儿茶酚胺能的神经元可以分为12组（A1-A12），其中有两组主要的去甲肾上腺素能神经元，一组位于延髓，另一组则位于腹侧脑桥即A5区，A5是一个没有明确定义的解剖结构，是腹侧脑桥的一部分。逆向和顺向标记表明,A5投射到同侧的KF核和Parabrachial Nuclei,并投射到延髓孤束核（NTS）。有研究[2]在腹侧脑桥尤其是A5区记录到与呼气相关的神经元。放射自显影及免疫细胞化学研究证实[3，4]在腹侧脑桥的嘴端包括PBKF核的中间部及尾部神经元细胞内包含有高浓度的NMDA受体。由此我们推测，腹侧脑桥参与了呼吸调整，而且这种呼吸调节可能与NMDA受体有关。本实验通过电刺激腹侧脑桥A5区并微量注射L-谷氨酸钠,观察对膈神经呼气放电的影响，从而分析家兔腹侧脑桥对呼吸的影响及其可能机制。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物 成年健康家兔43只，雌雄不拘，体重2.0-2.5Kg，由山东大学实验动物中心提供。 1.1.2 设备与仪器 AVB-10（Nihon Kohden，高频滤波3KHZ，低频滤波50HZ）生物放大器为日本光电公司产品，VC-10双线记忆示波器及监视器为Nihon Kohden，日本光电公司产品，SEN-3201（Nihon Kohden）型电刺激器、CO2监测仪（OIR-7101型Nihon kohden）PCI-6024E数据采集卡为美国National instruments公司产品，BioBench软件由美国NI公司提供。 1.2 方法 1.2.1实验步骤 经哺乳动物常规手术操作后，将动物头部以俯卧位固定于立体定向仪上，暴露顶骨、顶尖骨和上枕骨，调整头位使人字缝尖和枕外结节两点位于同一水平面上，从而使脑桥背面基本保持水平位置。分离双侧膈神经，膈神经悬挂于双极银丝记录电极，放电输入到生物放大器，放大后的信号引入双线记忆示波器及监视器，同时引入PCI-6024E数据采集卡，进入计算机后通过BioBench软件对信号进行记录、分析、处理。根据Sawyerrsquo;s图谱（图1）调节微电极位置，给予微电刺激引起面神经反射表现为胡须或鼻子的抽动，直到不能引起这一反射的深度，注射前先通过钨丝微电极（尖端0.01～0.02mm,阻抗5～10 MOmega;）刺激引导出呼气延长。实验整个过程中监测平均动脉血压和终末呼出气CO2分压。 图1.腹侧脑桥定位，图中箭头所指为电刺激和微量注药部位，该部位靠近面神经根腹侧中间部位 Fig.1 Location of ventrolateral pons,which located ventrall and medial to the exit of the facialmotor nerve 1.2.2 刺激参数 腹侧脑桥电刺激 频率100HZ，强度20～50mu;A及强度50～80mu;A，波宽0.3ms，串长3s。 1.2.3 注药方法 将1mu;l微量进样器垂直固定在微电极推进器上，根据Sawyerrsquo;s图谱定位，水平方向调整微量进样器使其尖端垂直正对注射部位，将尖端缓慢插入脑组织至所需深度，缓慢推注1mu;l药液（10mM），注射时间约一分钟。为排除渗透、PH及压力等因素对脑组织的影响，采用等量、等渗、等PH的生理盐水（NS）在注射位点作对照注射。 1.3 统计学分析 实验获得计量资料输入统计分析软件，用实验前后的配对t检验