病毒性肺炎患儿外周血自然杀伤细胞和T淋巴细胞亚群的变化.docVIP

精品论文 参考文献 病毒性肺炎患儿外周血自然杀伤细胞和T淋巴细胞亚群的变化 杨翠珍 任宪辉 杨洪亮 　　（牡丹江医学院第二附属医院；黑龙江牡丹江 157011） 　　摘要：目的 研究了病毒性肺炎患儿急性期和恢复期外周血中自然杀伤细胞（NK细胞）和T淋巴细胞亚群的变化。方法 选取2014年1-2015年6月我院收治的肺炎患儿126例为治疗组，及60例健康儿童为对照组。分别采集治疗组和对照组外周血，采用流式细胞仪对外周血CD16CD56、CD16、CD56NK细胞和CD3、CD4T和CD8淋巴细胞亚群变化进行分析；结果 与对照组比较，治疗组患儿CD16CD56、CD16NK细胞在急性期、恢复期和康复期均显著低于健康对照组（P＜0.05）；与对照组比较，治疗组CD3、CD4淋巴细胞亚群及CD4/CD8比值明显下降，CD8明显增加，差异均具有显著统计学意义（P＜0.05）。结论 病毒性肺炎患儿免疫系统严重紊乱，动态监测肺炎患儿外周血自然杀伤细胞和T淋巴细胞亚群的变化规律，对预测其病程及预后有重要意义。 　　关键词：病毒性肺炎；自然杀伤细胞亚群；T淋巴细胞亚群 　　病毒性肺炎是由上呼吸道病毒感染、向下蔓延所致的肺部炎症，是临床儿科的常见病、多发病，主要发生于冬春季节，通过飞沫或者直接传播为主，传播速度迅速，目前是导致我国小儿死亡的原因之一[1]。病毒性肺炎病原体主要包括呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感及副流感病毒等[2]。患儿一旦感染病毒后，机体免疫系统会发生相应变化，其中NK细胞和T淋巴细胞亚群均在病毒感染过程中起重要的免疫调节作用。本课题分析了病毒性肺炎患儿外周血NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化，为临床诊断和治疗疾病提供一定的参考价值。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 我院2014年1月-2015年6月收治的 126 例病毒性肺炎患者为治疗组，诊断标准参照第4版《儿科学》[3]， 　　根据ELISA方法监测病毒特异性IgM抗体阳性者确诊为病毒性肺炎。126例患儿其中男71例，女55例；年龄2-48个月，平均（14.3plusmn;10.5）个月；病毒感染类型：副流感病毒 45例，流感病毒40 例，呼吸道合胞病毒25 例，腺病毒16 例。对照组：同期门诊保健的健康儿童 60例，男32例，女28例；年龄2-46个月，平均???14.3plusmn;10.5）个月。无器质性病变，近一个月内未患过呼吸道感染、发热或其他疾病者。 　　1.2方法 　　1.2.1试剂 人CD16、CD56、CD3、CD4、CD8、抗体购自BD公司。 　　1.2.2标本采集 治疗组分别在肺炎第2，10天采血，健康对照组于体检当天采血，二组均空腹抽取静脉血4ml肝素抗凝。按照1：10加入红细胞裂解液，5min后1000rpm/min离心3in 弃上清，沉淀用PBS洗涤两次，用于后续分析。 　　1.2.3流式细胞仪检测：分别取上述处理样本，细胞数量调整到1-2times;106 /管，均用PBS+1﹪BSA冰上封闭30min,离心弃上清，重悬于100ulPBS+1﹪BSA缓冲液中，加入小鼠抗人CD16FITC和CD56PE各1ul,4℃避光孵育30min,结束后用PBS清洗3次，重悬于500ulPBS缓冲液用流式细胞仪进行检测。每个样本重复3次。在单个水平分析CD16、CD56、CD3、CD4 、CD8、表达。 　　1.3 统计学处理 采用SPSS11.0软件进行处理，计量资料用xplusmn;s表示，均数间比较采用t检验。 　　2. 结果 　　2.1各组NK细胞亚群的变化 结果如表1所示，与对照组比较，病毒性肺炎患儿急性期和恢复期外周血CD16、CD16CD56 NK细胞比例明显下降，而CD56NK细胞明显增加，差异具有显著统计学意义 （Plt; 0.05） 。急性期患儿CD16、和 CD16CD56NK细胞下降水平较恢复期更为显著，差异具有统计学意义（Plt; 0.05）。 　　 　　3.讨论 　　病毒性肺炎是儿科呼吸道常见疾病之一，目前认为其发生与病毒的毒力、感染途径以及宿主的年龄、免疫功能状态等有关。 　　NK细胞和T淋巴细胞是重要的细胞免疫成分。NK细胞可通过自然杀伤、抗体依赖的细胞毒作用以及分泌细胞因子等途径杀伤病毒感染细胞、肿瘤细胞或者寄生虫等。NK细胞分为三个亚群，包括CD16 NK细胞、CD16CD56 NK细胞、 CD56 NK细胞。不同亚群细胞其杀伤能力也各有差异，其中CD16 NK细胞最强，CD16CD56 NK细胞次之，CD56 NK细胞最弱。本课题分析了病毒性肺炎患儿急性期和恢复期NK细胞亚群的变化，结果显示病毒性肺炎患儿外周血中CD16 NK细胞、CD16CD56 NK细胞数量明显下降，而CD56 NK细胞