直立式聚丙烯输液袋细胞毒性检测.docVIP

精品论文 参考文献 直立式聚丙烯输液袋细胞毒性检测 匡翠莲 邢罗祝 蔡绮 （云南省医疗器械检验所 650034） 【摘要】 目的 评价聚丙烯输液袋的细胞毒性情况。方法　本实验选取了3个不同批次的样品，采用琼脂覆盖法来进行直立式聚丙烯输液袋的细胞毒性检测。结果　在琼脂覆盖法试验中，使用L-929细胞在直立式聚丙烯输液袋检测过程中未观察到明显的脱色区和细胞溶解现象，细胞毒性评级为0级。结论　直立式聚丙烯输液器无细胞毒性作用，值得在静脉输液中推广使用。 【关键词】 直立式聚丙烯输液袋 琼脂覆盖法 细胞毒性 静脉输液治疗自20世纪30年代末引入我国以来，发展至今已成为我国临床治疗、疾病预防及营养补充中最基础、最普遍的方法之一。随着输液治疗的普遍应用，输液方式经过了从开放式、半开放式到全封闭式—软袋输液的发展过程，而输液产品随之由开始的玻璃瓶，到聚氯乙烯（PVC）软袋、到聚丙烯、聚乙烯（PP/PE）硬塑料瓶，直至目前世界上最为先进、且完全符合环保的非PVC复合膜软袋，其新一代全密闭输液产品—直立式聚丙烯输液袋具有直立、轻便、实用方便、快捷、安全等特点。一瓶输液的安全质量取决于药液的安全和质量、输液包装容器的安全和质量以及药液与容器之间的安全和稳定。细胞毒性试验是采用细胞培养技术，测定细胞溶解（细胞死亡），抑制细胞生长和其它毒性，用于评价器械、材料和／或其浸提液对细胞的毒性作用。直立式聚丙烯输液袋属于外部接入器械与血液接触类器件，作用时间为A类（＜24小时），按生物学评价试验要求对其进行细胞毒性试验。 1 材料和方法 静脉输液治疗自20世纪30年代末引入我国以来，发展至今已成为我国临床治疗、疾病预防及营养补充中最基础、最普遍的方法之一。随着输液治疗的普遍应用，输液方式经过了从开放式、半开放式到全封闭式—软袋输液的发展过程，而输液产品随之由开始的玻璃瓶，到聚氯乙烯（PVC）软袋、到聚丙烯、聚乙烯（PP/PE）硬塑料瓶，直至目前世界上最为先进、且完全符合环保的非PVC复合膜软袋，其新一代全密闭输液产品—直立式聚丙烯输液袋具有直立、轻便、实用方便、快捷、安全等特点。一瓶输液的安全质量取决于药液的安全和质量、输液包装容器的安全和质量以及药液与容器之间的安全和稳定。细胞毒性试验是采用细胞培养技术，测定细胞溶解（细胞死亡），抑制细胞生长和其它毒性，用于评价器械、材料和／或其浸提液对细胞的毒性作用。直立式聚丙烯输液袋属于外部接入器械与血液接触类器件，作用时间为A类（＜24小时），按生物学评价试验要求对其进行细胞毒性试验。 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 试验样品 直立式聚丙烯输液袋 规格100mL(昆明南疆制药有限公司 批号分别为：ZR111101，ZR111202，ZR111207)。 1.1.2 细胞：小鼠成纤维细胞（L-929）,购自中科院上海细胞所。试验时采用传代48-72小时生长旺盛的细胞。 1.1.3 主要试剂：琼脂粉,规格100g,（生产厂家：北京奥博星生物技术有限责任公司 批PBS缓冲液 规格250ml（北京崇文华广生仪器公司 批胎牛血清规格500ml（HyClone 批号 NUC0153)。 1.1.4 试验设备及材料 生物安全柜，二氧化碳培养箱，电动移液器，液氮罐，倒置相差显微镜照相系统。阴性对照为高密度聚乙烯，阳性对照为有机锡作稳定剂的聚氯乙烯。 2 方法与结果 2.1 实验方法 将试验样品制备成100mmtimes;100mm的圆片，边缘光滑整齐，高密度聚乙烯及有机锡作稳定剂的聚氯乙烯均制成100mmtimes;100mm的圆片为对照样品。将传代48-72小时细胞经消化液作用后，使贴壁细胞悬浮于营养液中，调节细胞悬液浓度至3times;105个细胞／ml。从持续搅拌的细胞悬浮液中吸取等量的悬浮液10ml,注人每只试验用平行器皿内，轻轻水平转动器皿，使细胞均匀地分散在每只器皿的底部。放入含5%CO2培养箱37℃plusmn;2℃下进行培养24小时，使其成为融合但不稠密的网状细胞单层。吸去原培养液，留下融合的细胞单层，将混合的Eagle琼脂培养基沿平面壁加入平面内，每皿10ml.轻轻转动平面，使琼脂培养基分布均匀并使其在室温下凝固。吸取10 ml新鲜配制的中性红活体染液，轻轻地置于已凝固的琼脂表面中央，使染液覆盖整个表面，避免强光照射，370C下染色15分钟，倾斜平面用吸管吸去多余的染液。将预先制备好的固体样品放置在试验平面上，每只琼脂表面对称的放一只阳性对照