寡营养菌对多环芳烃类化合物降解和机理研讨.pdfVIP

摘 要 多坏芳烃化合物是一个庞大、多样的有机化合物类群，尤指含三个或三个以 L芳环的化合物，其中许多种类对人类具有致癌性、致突变性和致畸性，可以通 过食物链进行转移而具有很高的生物放大作用。这类化合物在环境中分布广泛， 并且随着苯环数目的增加和结构复杂性提高，其生物降解性降低，在环境中的存 在更加顽固和持久。己有的研究多集中于高浓度的低分子量芳烃化合物，而对于 浓度极低，但仍然造成环境破坏和威胁人类健康的微污染多环芳烃研究较少。 本文从寡营养的常年水温在 18℃以下，有机物含量很低、远离工农业污染 源的新NI天池采集的水样中分离到一株对多环芳烃化合物具降解作用的寡营养 菌PYX-6，该菌株能够以花、蕙、菲等多种芳烃化合物及芳烃取代化合物作为唯 一碳源和能源生长，对菌株PYX-6以花为唯一碳源生长和底物降解的关系进行 了研究，结果表明，细胞生长比底物消失稍迟。0.005%酵母膏对细胞生长和花降 解有明显的促进作用，细胞生长和底物降解的最佳pH和摇床转速分别为pH6-8 和200r/min. 以四环芳烃化合物花为唯一碳源和能源进行培养，对细胞生长代谢过程中酶 的活性进行了检测，没有检测到邻苯二酚双加氧酶的活性，但检测到了多环芳烃 氧AM还原酶[PAHo-quinonereductase(PQR)]的活性，该酶通过还原Ap为邻苯二酚 在多环芳烃的降解中起着关键的脱毒作用。对菌株PYX-6降解花的代谢产物抽 提后，通过全波长 (190-800mn)扫描，HPLC,GC-MS检测分析，发现有新产 物邻苯二甲酸，苯丙烯酸，苯乙酸的存在，说明了菌株PYX-6具有新的花代谢 途径。 利用多环芳烃菲双加氧酶基因的一个片段 (phaAB,2.Okb)作为探针，通过 Southem杂交检测菌株PYX-6是否存在与该基因类似的基因，没有检测到杂交 信号，进一步证明了菌株PYX-6具有新的代谢途径和不同的双加氧酶基因参与 多环芳烃的代谢。 由于菌株PYX-6特殊的寡营养特征进一步对其进行了从形态、生理生化反 应、细胞壁组成、甲基蔡酿、磷酸类脂等化学分类指标到16rDNA序列测定， DNA-DNA杂交等的全面鉴定，结果表明菌株PYX-6为Saccharothrix属一个新 种，定名为新疆糖丝菌 (Saccharothrixxinjiangensissp,nov.)o 本论文的创新性:(1)获得了一株能够降解多环芳烃的寡营养菌PYX-6,通 过生理生化、DNA-DNA杂交等多相分类指标，鉴定菌株PYX-6为一个新种， 定名为新疆糖丝菌 (Saccharothrixxinjiangensissp.nov.);(2)发现菌株PYX-6 在降解花的过程中产生新的中间代谢产物邻苯二甲酸、苯丙烯酸、苯乙酸，结合 DNA探针杂交实验结果，证明了菌株PYX-6具有新的花降解途径。本项研究的 意义是一方面为修复多环芳烃污染的环境提供菌种资源，具有现实的实际意义， 另一方面，研究没有污染、寡营养环境下分离菌株的代谢途径，对于理解代谢途 径的起源、进化和产生，有着深刻的理论意义。 关键词:寡营养菌、多环芳烃化合物、代谢途径、新疆糖丝菌 (Saccharothrix xinjiangensissp.nov.)o Microbialdegradationandmetabolicpathwayofpolycyclic aromatichydrocarbonsbyoligotrophicbacteria HUW ing DirectedbyProf.LIUShuan自iang Polycyclicaromatichydrocarbons(PAHs)arefused-ringaromaticcompoundsthat areknowntoexertacutelytoxiceffectsandpossessmutagenicandcarcinogenic properties.Additionalyhigh-molecular-weightPAHscontainingfourormore aromaticringsareregardedwithmorerisksfortheirpotentialbioaccumulationinto foodchains.Theyexistwidelyintheenvironmentandarerecalcitrantt