生物制药工艺学教学（吉林大学）2016第二章发酵工程（4）.pptVIP

二、 微生物的营养 所需的营养物质及功能 碳源、氮源、生长因子、水和无机盐 1.碳源： 能为微生物提供所需碳元素的营养物质 无机碳源：CO2、NaHCO3 有机碳源：糖类(葡萄糖)等 功能：构成细胞和一些代谢产物； 同时也是异养型生物的能源。 2.氮源： 能为微生物提供所需氮元素的营养物质 常用：铵盐、硝酸盐最常用 无机氮源：N2、NH3、NH4+、NO3- 有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨 功能：合成蛋白质、核酸、含氮的代谢产物 * 3.生长因子 微生物生长不可缺少的微量有机物，包括维生素、氨基酸、碱基等，一般是酶和核酸的组成成分。 补充原因：微生物缺乏合成这些物质所需的酶 或合成能力有限 常用：酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等 4.水和无机盐 * 培养基配制的原则 ①、目的要明确 根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制 ②、营养要协调 注意各种营养物质的浓度和比例,最重要为碳源和氮源的比。 C:N=4:1，菌体数↑谷氨酸↓。 C:N=3:1，菌体数↓谷氨酸↑。 谷氨酸生产中 ③、pH要适宜 细菌：pH6.5~7.5 真菌：pH5.0~6.0 * 培养基的种类 根据物理性质分 固体培养基——用于微生物的分离、计数 半固体培养基—观察微生物的运动，鉴定菌种 液体培养基——常用于工业生产 根据化学成分分 合成培养基——成分明确,常用于分类,鉴定 天然培养基——成分不明确,常用于工业生产 根据用途分 鉴别培养基——在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物。 伊红和美蓝,与大肠杆菌的代谢产物结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽,可以用来鉴别大肠杆菌。 选择培养基——在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。 * 1． 分批发酵： 是一种准封闭式系统。 一次投料，一次接种，一次收获的间歇式培养方式。培养过程中，接种物要经过5个时期。即延迟期、 对数生长期、减速期、稳定期和衰亡期。 三． 发酵方式： 分批培养的特点：操作简单、周期短、染菌机会少和生产过程、产品质量易掌握。但是生产率相对较低。 * 连续发酵 优点 缺点 连续发酵 在培养过程中，不断地向发酵罐中流加培养基，同时以相同的流量从发 酵罐中取出培养液，这种发酵方式就是连续发酵。 　①可使微生物维持在对数生长期或维持在产物形成的高峰期。 　②产品质量稳定，生产率高，劳动强度低。 易染菌， 菌种易变异。 连续发酵 先作分批培养，让 微生物生长繁殖达到一定程度，并进 入产物合成期，然后开始以恒定的流 量向发酵罐流加培养基，同时以相同 的流量排放培养液，使发酵罐内培养液的体积保持恒 定，微生物能持续生长并合成产物。 进行单级连续培养时，流出的培养液进行固液分离 后，经浓缩的细胞悬液再被送回发酵罐中的方法。 把多个发酵罐串连起来，第一个罐的情况 与单罐培养相同，以后下一 罐的进料便是前一发酵罐的出料，这样就 组成了多级串联连续培养。 循环式 单级连 续培养 多级串联 连续培养 非循环式： * 3．补料分批发酵 在分批培养过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基，而不从发酵罐中间断地放出培养液的培养方法。 工业上利用分批补料培养以消除阻遏并保持通气条件。分批补料培养还可以防止培养基中某一组分的毒性。 * 常用的发酵设备 * 典型发酵罐示意图 电动机 pH检测及 控制装置 培养液 无菌空气 排气口 冷却水出口 冷却水进口 搅拌器 加料口 放料口 * 发酵罐 * 发酵的工艺控制 发酵过程需在以下方面监控，这些指标已经实现在线自动化。 1. 温度 升、降温度是通过发酵罐的夹套或换热蛇管 （排管）中的蒸汽或制冷剂，与发酵液进行热交换实现的。 2.溶氧 通风搅拌增加溶解氧 3.pH 调节方法为加酸、碱或稀释。 以上三项使用传感器监控。 4.泡沫 发酵过程产生过多泡沫会影响发酵正常进行，加入消泡剂可以减少泡沫生成。 5.中间产物 要使微生物和动植物细胞的代谢朝着所需的方向进行，应用细胞代谢调控知识引导，否则会出现过多的副产物。 6.杂菌污染 非发酵使用的微生物会随时进入发酵罐。确保菌种扩大