血液样本采集和血涂片制备医学教材.pptxVIP

血液标本采集和血涂片制备一、血液生理概要（一）血液的组成血液由（红细胞、白细胞、血小板）和血浆组 成血浆：血液加抗凝剂后分离出的淡黄色液体血清：离体后的血液自然凝固析出的淡黄色透 明液体血浆与血清的区别： 血清缺少某些凝血因子，如：凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ等。（二）血液的理化性质血量：成人约4-5L，约占体重的6%-8%， 血浆占55%，血细胞45%颜色：红色，动脉呈鲜红色，静脉血呈暗红色。严重贫血者 红色变浅。一氧化碳或氰化物中毒者血液呈樱红色酸碱度：成人PH 7.3～7.45，动脉血PH 7.40 静脉血pH 7.35比密和渗透量：男性约 1.055～1.063，女性约 1.051～1.060 相对粘度为4～5；血浆比密约1.025～1.030。 血液比密与红细胞含量、红细胞内血红蛋白含量有关 血浆比密与血浆内血红蛋白有关。血浆渗透量:约290～310mOsm／kg﹒H?O (三) 血液特性 悬浮稳定性红细胞在血浆中的悬浮稳定性 均匀混悬状态 粘滞性全 血粘度为生理盐水的4～5倍， 血浆粘度为生理盐水的1.6倍左 右 凝固性血液从血管中流出可自行凝固 （四）血液生理功能 运输功能 协调功能 维护机体内环境稳定 防御功能 稀释 用无菌干棉球擦去吸管外部血液，将吸管伸 入装有稀释液的试管底部，慢慢排试管内的 出血液，并用上清液清洗管内余血2～3次， 最后将试管内的血液混匀3、注意事项（1）所选采血部位皮肤应完整，无烧伤、冻疮、发绀水肿或炎症，除特殊情况外，不要耳垂采血（2）应严格无菌操作，防止采血部位感染，做到一人一针一管，避免交叉感染。（3）消毒后，待乙醇挥发后采血，否则流血不易成滴（4）因第一滴血混有组织液，应擦去，应向结果的准确性 （三）真空采血法： 真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。封闭式采血避免了容器之间的转移，减少溶血现象，能有效保护血液有形成分，保证待检样本原始性状的完整性，是检验结果更可靠。能有效避免医护人员与患者之间的交叉感染 。各种真空采血容器根据需要标有不同的色码，适用于不同检验项目（表1-1-1）。（四）方法学评价1、皮肤采血法： 缺点易溶血、凝血、混入组织液，局部皮肤揉擦、刺针深度不一等影响检验结果；结果重复性差、准确性不好 2、 静脉采血法： 开放式采血法，操作环节多、难于规范、易造成血液污染；封闭式采血法，操作规范，利于样本运送和保存，防止院内血源性传染病。（五）质量控制 1、患者 患者活动情况、精神状态、药物等会影 响检测结果 2、采血 止血带结扎应＜1min 3、溶血 容器不洁净、剧烈震荡、操作不当引起 溶血使血细胞计数、血浆、血清化学成 分改变等多项指标检验结果发生变化 4、样本处理 采血后立即送检，标本保存不当直接 影响检验 结果5、实验结果分析 应考虑药物、饮食等因数对结果的影响，同时密 切结合临床三、抗凝剂的选择抗凝： 是用物理或化学的方法除去或抑制血液中的 某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。抗凝剂或抗凝物质： 能够阻止血液凝固的物质 常用的抗凝物质如下： 1、乙二胺四乙酸（EDTA）盐 钠盐（EDTA﹒Na?H?O）钾盐（EDTA﹒K?H?O），能与血液中的钙离子结合成螯合物，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固。 其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。 血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为 EDTA- K2?2H2O 1.5～2.2mg/ml血液 2、草酸盐 草酸根离子能与样本中的钙离子形成草酸钙沉淀， 使钙离子失去作用，阻止血液凝固。 草酸盐： 溶解度好、廉价，但对凝血因子Ⅴ的保护作用差，影响凝血酶原时间测定，因此草酸盐不适用于凝血检查。 3、草酸盐双草酸盐： 不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、红细胞计数、网织红细胞计数 可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适用于血小板计数、白细胞分类数 4、肝素 加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。 肝素具有抗凝力强、不影响红细胞体积、不易溶血等优点，绝大都数检查都可用肝素做抗凝剂，是红细胞渗透脆性试验的的理想抗凝剂。 可影起白细胞聚集瑞，氏染色后产生蓝色背景，不适用于CBC、细胞形态学检查 5、枸橼酸盐 常用有枸橼酸钠，能与血液中的钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。 应用范围：血沉、凝血象、血小板功能检查及血 液保养液。 凝血: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9； 血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。四、血液涂片制备（一）载玻片的清洁 1. 新玻片 1mol/L HCl泡24小时→水洗→干燥。 2. 旧