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第三章　转录——从DNA到RNA 转录作用的总结 3.1 RNA的转录 RNA pol 执行多功能 * Chapter 3: Transcription 3.1 RNA的转录 3.2 启动子与转录起始 3.3 终止和抗终止 3.4 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 3.5 内含子的剪接、编辑及化学修饰 转录----生物体以DNA为模板合成RNA的过程 转录所需的酶叫RNA聚合酶（依赖DNA的RNA聚合酶） 复制和转录的异同点 相同点： 1.都以DNA为模板 2.原料为核苷酸 3.合成方向均为5′→3′方向 4.都需要依赖DNA的聚合酶 5.遵守碱基互补配对规律 6.产物为多聚核苷酸链 不同点： 　复制 　　　转录 模板 　 两股链均作为模板 模板链作为模板 原料 　 dNTP NTP 聚合酶 　DNA聚合酶 RNA聚合酶 产物 　 子代DNA双链 mRNA;tRNA;rRNA 配对 　A-T；G-C A-U；T-A；G-C 引物 　 需RNA引物 -------- 方式(特点) 半保留复制 不对称转录 两股DNA单链中只有一股可转录,可作为模板转录成RNA的一股称为模板链（无意义链）,对应的一股互补链称为编码链（有意义链）.能转录出mRNA然后指导蛋白质合成的部分称为结构基因.其余的DNA可能转录(rRNA,tRNA),也可能不转录。 不对称转录:DNA分子上一股可转录,另一股不转录;模板链并非永远在同一单链上. 转录作用是DNA指导的RNA合成作用。反应是以DNA为模板，在RNA聚合酶催化下，以四种三磷酸核苷（NTP）即ATP、GTP、CTP及UTP为原料，各种核苷酸之间的3′、5′磷酸二酯键相连进行的聚合反应。合成反应的方向为5′→3′。反应体系中还有Mg 2+、Mn 2+等参与，反应中不需要引物参与。碱基互补原则为A-U、G-C，在RNA中U替代T与A配对。 在多基因的双链DNA分子中，每个基因的模板不是全在同一条链上，也就是在双链DNA分子中的一条链，对于某基因是有义链，但对另一个基因则可能是反义链。 　 　3.1.1 转录的基本过程 　3.1.2 转录机器的主要成分 3.1 RNA的转录 3.1.1 转录的基本过程 　　　包括：模板识别、转录起始、通过启动子及转录的延伸和终止。 转录作用开始时，RNA聚合酶结合于基因的特定部位，在此附近DNA双键打开约17个碱基对，形成一转录泡，进行核苷酸的聚合反应。随着RNA聚合酶沿着DNA模板链向5′末端的方向移动，核苷酸的聚合反应继续进行。 识别阶段 　　　RNA聚合酶（全酶）通过σ亚基发现其识别位点后，首先与-35区序列结合形成一个封闭的启动子复合体 转录起始 　　　形成一个聚合酶-DNA-新生RNA的三元复合物。 延伸 　　　核心酶向前移动，RNA链不断生长。 终止 　　　RNA聚合酶到达基因转录，RNA链和聚合酶随之脱落。 　　　真核细胞与原核细胞在模板识别上的差别：真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动子区，需要转录调控因子的辅助蛋白质的作用，使RNA聚合酶与启动子结合形成复杂的前起始复合物（PIC）。 3.1.2 转录机器的主要成分 3.1.2.1 RNA聚合酶 1. RNA聚合酶是转录过程中最关键的酶 双链DNA为模板 4种核苷三磷酸为活性前体 Mg2+/Mn2+为辅助因子 不需要引物 产物------RNA (1)识别DNA双链上的启动子； (2)使DNA变性在启动子处解旋成单链； (3)通过阅读启动子序列，RNA pol确定它自己的转录方向和模板链。 (4)催化适当的NTP以3′、5′磷酸二酯键相连接，如此连续进行聚合反应完成一条RNA转录本的合成。 (5)最后当它达到终止子时，通过识别停止转录。 RNA聚合酶还参与了转录水平的调控。 2. 原核生物RNA聚合酶 分子量为480kD，由四个亚基组成 　　　　　α2ββ′σ(全酶) 去掉σ亚基称为核心酶。 E.coli中不同的?因子可识别不同的启动子 ?因子的作用只是起始转录，一旦转录开始，它就脱离了起始复合物，而由核心酶负责RNA链的延伸。 因此，全酶的作用是启动子的选择和转录的起始