新城疫病毒3种检测方法的研究比较精选.pdf

中国生物工程杂志 技术与方法 新城疫病毒 种检测方法的研究比较 郭 浩 邹明强 于东升 刘小雷 云彩麟 杜景娇 中国检验检疫科学研究院北京 内蒙古医学院 呼和浩特 内蒙古精神卫生中心 呼和浩特 大连医科大学大连 摘要 目的利用 种方法对新城疫 病毒进行检测并对这 种检测 方法的优缺点做出比较 方法分别将强毒 和弱毒接种鸡胚后获取尿囊 液 利用双抗夹心 法 悬液芯片系统以及 进行检测 通过对制备的针对新城疫病毒 的抗体 和 蛋白浓度测定后选择 进行生物素标记将 作为固相捕获抗体利用生 物素链霉亲和素放大系统构建双抗夹心检测体系 通过对 上已发表的新城疫强弱毒 基因进行电脑分析后设计一组针对强弱毒的通用型引物分别对强弱毒进行并检测 其检出限 结果法对强弱毒尿囊液的检出灵敏度为 但操作繁琐耗时长液相 芯片对强弱毒尿囊液的检出限为 和 然而和 相比 操作较为方便 但仪器设备昂 贵 对强弱毒检出限分别为和与前两种方法相比在核酸水平上 对病毒进行检测理论上灵敏度较高但是所需试剂设备昂贵且实验人员还需一定的技能培训 关键词新城疫 悬液芯片 中图分类号 新城疫病毒 是副黏 入了大量的人力物力来研究新城疫的检测技术 目前 病毒科禽腮腺炎病毒属的唯一成员可以感染 余种 常规的新城疫检测方法主要有病毒分离培养电镜技术 禽类鸟类和其他动物典型症状为呼吸困难下痢浆 血清学检测以及分子生物学检测等方法 常国权等 通 膜黏膜出血神经症状等 新城疫最早发生于印尼的爪 过纯化鸡粪中的负染后电镜检查可观察到大量 哇和英国的新城 年首次分离到病原并将该 的粒子且杂质较少 但电镜设备价格昂贵操作 病命名为新城疫 由于发病急致死率高新城疫被国际 困难且进行观察确定病原时需要有一定工作经验的专 兽医局列为类烈性传染病自 年报道本病以来一 业技术人员进行判定因此难以得到广泛应用 而病毒 直是危害世界养禽业的最主要病患之一 分离培养往往还需结合血凝与血凝抑制试验等检测方 由于新城疫死亡率很高严重危害养鸡业造成巨大 法 该方法的检测周期长操作程序繁杂不适用于该病 的经济损失 我国每年因此造成的损失极为严重根据 的快速诊断 为了寻求一种实用快速灵敏度高的检测 农业部估计我国每年因各种禽病的经济损失高达数十 方法本研究将双抗夹心法悬液芯片系统以及 亿元其中 占了近 几年来欧盟和日本韩国 分别对新城疫强弱病毒检测做出比较为基层 等均从我国出口禽群中分离到而停止过对我国的 检验检疫部门提供参考依据 禽类出口贸易由此造成了巨大的经济和政治损失故世 材料与方法 界各国政府对新城