α-淀粉酶的合成与应用.ppt

8 7 6 5 4 3 PICTURE START 论文名称 制作人：王继猛 专 业:09级生物工程 α-淀粉酶的合成与应用 论文框架 1 淀粉酶的产生菌及酶的特性 2 3 淀粉酶的纯化和提取 淀粉酶的用途及展望 1 淀粉酶的产生菌及酶的特性 淀粉酶可由微生物发酵产生， 也可从植物和动物中提取 ， 目前工业生产上都 以微生物发酵法进行大规模生产 淀粉酶。 随着淀粉酶 的用途日益扩大，产量见增多。生产水平也逐步提高近些年我们国家的酶制剂行业发展较快 ，从 1 9 6 5年开始应用解淀粉芽孢杆 菌BF一7 6 5 8生产淀粉酶，当时仅无锡酶制剂厂独家产近年在国内生产酶制剂的厂家已发展到 l2O多个，其中约有 4 O左右的I厂生产淀粉酶 ，产品也由单一的常温I业用 d 一 淀粉酶 ，发展到现在有工业用也有食品鼓，既有常温也有耐热的，剂型上有固体 的也有液体淀粉酶 。 选种 世界 上许多国家都以枯草杆菌， 地衣芽孢杆菌产细菌淀粉酶和米 曲霉生产的真苗淀粉酶为 主要产品， 在工业生产中使用的菌种，最初都 是从 自然中得到的，通过筛选和诱变育种工 作， 可改变菌种的特性 ，提高 α-淀粉酶的活力。 Onttrup以地衣芽孢杆苗ATCC9798为出发菌株 ，用Y射线，NTG以及uV反复7次诱变 ，使其α-淀粉酶的产 量为原苗株的25倍。Andreeva 等将枯草杆菌孢子悬浮液经 5 0 ℃加热处理 3 0分钟， 酶 合成速度提高了 2 —2 ,7倍，可见采用诱变育种是行之有效的 方法 ，但也有一定的局限性和缺点，由于发生平顶效应使之育种效果降低. 随生物工程技术的发展基因工程技术已应用到菌种的改造方 面。Palvar2等把解淀粉芽孢杆菌α-淀粉基因克隆到枯草芽孢杆菌中，其 α-淀粉酶活力 比其原始的野生型苗株高500倍。我国在利用基因重组构建耐热性 一淀粉酶方面已取得一定的进展何超刚等将脂肪嗜热芽孢杆菌淀粉酶基因质粒带人大肠杆菌 ，使后者具有生高淀 粉酶能力 。任大明0将带有淀粉酶基因的克隆片段 ，在枯草杆菌中得到表达。朱卫民将枯草杆菌 a淀粉酶基因在大肠杆苗中的得表达 。 二 淀粉酶的纯化和提取 为了提高收率、 降低成本 ， 对酶回收所做 努力不亚于改进发酵工 艺 。从发酵 液作成酶 翩剂所用单元操作主要 是固液 分离 、 浓缩 、 沉淀以及干 燥 、 粉碎 。其 中固液分离是个关 键。由于发酵液 固型物呈胶质状， 特别是细苗发 酵液带阴电荷 ． 固液分离困难 ， 必须通过聚电 解质絮凝剂处理 ， 再在硅藻土等助滤剂存在 下用板框压滤机过滤 工业酶制剂有液体和 固体 两种形态， 液体酶是除菌浓缩液加入稳 定剂和防腐剂， 再标准化而成。 固体酶最简便 方法是将浓缩酶液喷雾干燥 ， 或者用盐析和 溶剂 沉淀的方 法 。 目前 我国 对 a 一 淀粉 酶 下游 工 程 的 研 究 做了许多工作。王玉华口 报导在发酵液中加 硫酸铝 0 .4 7 .再加分子量 2 0 0万的聚丙烯 酰胺 2 9 4 mm ol ／ l絮凝， 漏 斗中过 滤可提高 2 ． 9倍。刘叶青” 报导用磷酸钙凝胶絮凝 α-淀粉酶发酵液 ， 再 辅以啊离 子高分 子 絮凝剂 进行 淀粉酶絮凝提取是可行的。赵铭等将发酵液用高分子絮凝剂处理 ,小型板框压滤机过滤达 l 5 .9 L ／ r n b,而不絮凝者无法过撼 。 三 淀粉酶的用途及展望 淀粉酶的用途 极为广泛,不同来源的淀粉酶 ,具有不同的性质，不同性质的酶具 有不同的用途 。黑 曲霉酸性 淀粉酶适用于制造助消化的药物。米曲霉的α-淀粉酶耐热 性较差，用于面包工业。糖化塑细菌淀粉酶因产物具有较多的麦糖,可用以制造低 D值的糖类,而耐热性强的细菌淀粉酶,由于液化全,用酶量少,操作较容易,适于淀粉液化及棉布退浆 ,酶法生产葡萄糖以及石油压裂。目前，一淀粉酶已用在淀粉加工业面包工业，发酵工业，饲料制造等。如表 I 所示。由于淀粉酶的用途广泛，在市场上一定粉酶是产量最大的酶类之一。 表 I 用 造 说明 淀粉加工 制造葡萄糖浆，制造怡糖 ，翻造葡萄糖 ，制造各种粉末糊精 ，制造造各种浆糊、 粘着剂 酿造发酵业 啤酒原料的液化，酒精原料的液化及糖化酱油,醋原料理 纺织品工业 各种织物退浆 面包工业 改瞢质量风味, 缩短时间节约用糖 医药工业 消化药 饲料工业 与其它酶一起促进消化 其 他 普料加工 、 遗纸 、 石油压裂 、 暴汁制 造 关于国内α-淀粉酶的前景 近