检测猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR方法的建立研究.pdf

猪的传染病 昌、张掖、临洮、天水和白银等地区流行。这两个毒株属两个起源不同的群。 黜：餐：：：：。 ：忠：兰：：： 黜：：甲“”” 譬船浮“” 荆：：：器；：： 粥：：：：嚣黑 篇怒盎忽。。 ：踺譬：。。。 ：：：嚣。，。， 黜；Z名箸雀：：。。。。 ：：篱篾：：嚣：。。 裂：；罴。。。。。 船二，“ ：：盅”””4““ o㈣rⅣ ‘ o NucI删d．8山。”¨矗n。o—oo) 图I 29个Pcv2毒株的系统发育树 袅3 PMwS疑似癌情的病原检测结果 3．4病原学调查显示，圆环病毒2型与其他病原的混合感染率以HCV和P脚tSv最高。 3．5规模化猪场防疫工作的问题和漏洞是圆环病毒病发生和发展的重要条件，这些因素 是新病传入和旧病复发，消毒工作不规范、不彻底，没有严格的种源净化措施，环境污染和 有害生物的控制滞后．缺乏台理、系统的免疫程序，疫苗使用不规范，监测技术落后或空白， 规模化猪场与周围群众缺乏联防措施，大型化猪舍设计等。 参考文献略 刘傻平2，陶砖2，单松华2，庄金山1，孙志’，张建武”，袁世山’ (中国农业科学院上海善匡研究所动物待染病研究室农业部动物寄生虫学重点开放实验宣，上海 200232；2．上海出入境检验检疫局．上海200135) 捕墨l针对猪圈环病毒2型ORF2的序列设计两对特异性引物厦TaqMan探针，以猪田环病毒2型的PK-15 “基盎项目：上海市科委猪圆环病毒诊断标准的研究 编号：05dz05们l 作者简介：刘使早(_)。男．上海．实习研究员，主要从事分子病毒学方面研究 通讯作者：张建武TEL；02l-mail： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 细胞培养物的DNA提取物为模板．分别扩增499bp和131bp的片段，成功建立了检测猪圆环璃毒2型的 1均M眦荧光PcR方法．蛄果表明：1姻M蚴荧光PcR检测Pcv2的最佳探针浓度为0，5pmou姑1砷M卸 有很好的重复性；在诸多检测样品中，只能检测到猪圆环病毒2型．针对猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒 系统结果均为阴性，表明特异性好：与瞢通PcR的检测鲒果(2，10)比较．本方法的敏感性和对临床样品 的阳性检出率(3，10)曼高．上述研究表明，本方法快速，敏感，特异．具有很高的重复·|生．且可实时监 洲，从而有效检测特圃环病毒2型． 猪圆环病毒(Porcimcircovims，Pcv)2型为最近兽医界广泛关注的新发病原之一，该病 毒