海洋耐盐粘细菌对海陆两栖生活方式的进化适应分子机制及其意义研究.pdf

2008年中国微生物学会学术年会 海洋耐盐粘细菌对海陆两栖生活方式的进化适应， 分子机制，及其意义 李越中 山东大学微生物技术国家重点实验室济南250100 粘细菌(Myxobacteria)是一类具有复杂多细胞行为特性的革兰氏阴性细菌，再系统分 类上属于多变细菌的6分支。粘细菌在细胞生长、摄食、运动和分化发育等方面，尤其是子 实体(fruiting body)形态发生中表现显著的社会特性(sociality)，被认为是生活于多细胞 xanthus 生命边缘的单细胞生物类群。以黄色粘球菌MyxococcusDKl622为模式材料开展的 粘细菌多细胞行为研究主要在两个方面——细胞的运动和子实体的形态发生。粘细菌细胞的 运动方式是适应于固体介质表面的滑动运动(glidingmotility)，而子实体是粘细菌细胞在固 体介质表面分化发育形成的抗逆结构。多细胞行为特性明显地指示粘细菌是适应于陆地生活 的细菌类群，并通常仅在土壤或其他陆地环境中发现。以模式菌株DKl622为材料进行的人 工进化实验也表明，液体中连续培养的细胞相比于原始出发细胞，所有的社会性行为均显著 降低或丢失。然而，近年报道在海洋环境中发现存在耐盐或嗜盐生活的粘细菌。由于海洋环 境不能满足粘细菌多细胞生活方式的要求，分析并阐明海洋粘细菌的生活模式对于我们认识 粘细菌的多细胞行为，及其多样性和进化有重要意义。 1、海洋粘细菌的生活模式 到目前为止，所有可培养的海洋粘细菌仅在近海边被分离发现。海洋嗜盐粘细菌通常不 能形成典型的子实体结构，生长对细胞密度有依赖性，适应的盐浓度范围较宽，但不能在无 NaCl的条件下生长。另一方面，海洋耐盐粘细菌在非海水条件下表现与陆地粘细菌相似的 复杂多细胞行为，如细胞能够形成典型的子实体结构，并在子实体结构内发育生成粘孢子， 孢子的萌发对高密度细胞有依赖性等。但在海水条件下，耐盐生长的粘细菌却表现特殊的简 单细胞行为特性，如细胞仍可以滑动运动，但不形成子实体，并可以在不依赖于子实体生成 的条件下发育形成粘孢子，粘孢子萌发对细胞密度的依赖性极大地降低等。因此，海洋耐盐 粘细菌菌株适应于近海环境的易于变更的特点，进化形成了在海洋和陆地两种生境中具备不 同的生活和分化发育模式的特性。一种是简单的“海洋”模式，可以直接从营养细胞分化形成 粘孢子抗逆，细胞生长适应于海水环境而降低密度依赖性；一种是复杂的“陆地”模式，细胞 抗逆通过发育形成多细胞的子实体结构和其中的粘孢子，细胞的生长依赖于高细胞密度。海 洋耐盐粘细菌可以在海水和非海水的不同环境中迁徙生活，并在不同环境中变换生活模式， 表现复杂的海陆两栖生活模式。根据系统发生分析和细胞的生活方式，我们认为，嗜盐粘细 菌可能是海洋的土著类群，而耐盐粘细菌则是陆地粘细菌适应海洋环境的海陆“两栖”类群。 我们对耐盐粘细菌适应海洋生境的机制进行了研究。 2、运动适应 粘细菌复杂的多细胞生活方式是通过其独特的双运动系统．细胞群体的社会运动(social motility，S一运动)和细胞个体的探险运动(adventuremotility，A．运动)协调实现的。A．运 动和S一运动同时存在并协同作用时粘细菌细胞才能表现完整的社会性行为。对不同程度耐 盐的粘球菌分析表明，在海水存在的条件下，细胞的A．运动和S．运动能力都保持，并且S． 运动能力增强。粘细菌细胞的S．运动是通过Ⅵ-型pili的伸缩及其对细胞表面物质组成 (extracellular matrix，ECM)的识别和附着而实现。我们对一株耐盐粘球菌HW-1的插入突 变株的鉴定结果表明，该菌株不能耐盐生长，而S．运动能力也几乎丢失。发生突变的m黯 26 2008年中国微生物学会学术年会 与真核生物细胞表面的Ⅲ型Thrombospondin基因在序列和功能上有较高相似性。但敲除陆 粘细菌可能通过增加细胞的S一运动能力，从而增加细胞问的协同作用而适应海水环境生活。 进一步，我们制备了模式菌DKl622中已经报道的60个运动相关基因的芯片，对HW-1菌 株在海水和非海水条件下的运动相关基因的表达进行了分析。