促甲状腺激素生物素．亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立研究.pdfVIP

标记免疫分析与临床 2013年2月第2O巷第 1期 3l · 方法研 究 · 促 甲状腺激素生物素．亲和素酶促化学 发光免疫分析方法的建立 李丽波，刘一兵，官国英 ，姚 焱，刘中瑞，侯惠仁，梁瑞鹏 (原子高科股份有限公司，北京 102413) 摘要：目的 建立一种低成本 、高灵敏度的检测血清促 甲状腺激素(TSH)的生物素一亲和素酶促化学发光免疫分析方法。 方法 引入生物素一亲和素放大系统，一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板，另一株标记生物素，辣根过氧化物酶标记链 亲和素，鲁米诺作为发光底物，采用夹心法 ，建立 TSH 酶促化学发光免疫分析方法。结果 方法分析灵敏度为 0．O1mlU／L，批内变异系数为2．01％一5．40％ ，批问变异系数为2．96％一17．9％，回收率为90．6％一114．4％，高值促甲状 腺激素血清样品经系列倍比稀释后，测定值与稀释度呈线性关系，相关系数大于0．99，与原子高科TSH免疫放射分析方 法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有 良好的相关性。结论 生物素一亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成 本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点，具有广阔的应用前景。 关键词：促 甲状腺激素；链亲和素化酶；生物素一亲和素系统； 鲁米诺； 酶促化学发光免疫分析 中图分类号：R一331；R581 文献标识码：A 文章编号：1006．1703(2013)01—0031．05 doi：10．11748／bjmy．issn．1006—1703．2013．01．010 ChemiluminescenceImmunoassayforThyroidStimulating HormonebyUsingBiotin-avidinSystem LIIJi—bo，LIU Yi—bing，GUAN Guo—ying，YAO Yan，LIU Zhong—rui， HOU Hui—ren，LIANG Rui—peng (High—techofAtomCo．Ltd．，Beijing102431，China) Abstract：Objective Toestablishalow-costandhigh—sensitivitychemiluminescenceimmunoassayforthyroid stimulatinghormoneinhumanserum byusingbiotin—avidinsystem．M ethodsTwomonoclonalantibodiesofTSH wereusedintheassay．OBewascoatedonthemicrotiterplateandtheotherwasbiotinylated．Thestreptavidin labeledhorseradishperoxidase，luminolandhydrogenperoxidewereusedinthissystem toestablishtheassay． ResultsTheassaysensitivityofthemethodwas0．01mIU／L．Theintra—assayandinter—assaytoemcientsofvar． iationwere2．O1％ ．5．40％ and2．96％ 一17．9％ ．respectively．Theanalyticalrecoverywas9O．6％ 一l14．4％ ． Thecorrelationtoefficientswerebeyond0．99afterserialdilutionsoftwo sampleswith high concentrationof TSH．TheexaminationresultoftheassaycorrelateswellwiththatofIRMA andRocheECLIA．ConclusionTh