玉米赤霉烯酮对TM3细胞原癌基因及细胞间隙连接通讯的影响.pptVIP

* 兽医学院 College of Veterinary Medicine, Yangzhou University Copyright ? 2013 Yangzhou University 2015 汇报论文名称： 玉米赤霉烯酮对TM3细胞原癌基因及细胞间隙连接通讯的影响 汇报论文目录 （一）背景 （二）目标 （三）完成情况 （四）研究成果及成效 （五）特色与创新点 （六）存在问题、建议及展望 玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEA）是由镰刀菌等真菌产生的一种具有雌激素样作用的霉菌毒素，在谷物和饲料广泛存在，危害人和动物健康，但关于引起癌症研究较少。 （一）背景 （二）目标 为揭示 ZEA 致睾丸间质肿瘤发生的机制和预控提供理论依据,同时为睾丸间质肿瘤防治提供研究方向,进行了本研究。 （三）完成情况 论文在获得江苏省大学生实践创新训练计划项目(201411117028Z)、江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)、江苏省普通高校自然科学基金(08KJD230002)支持并取得相关科研成果下，于权威期刊《中国兽医学报》2015 年 第35卷第 3 期公开发表学术论文 1 篇。 研究小鼠睾丸间质细胞暴露在浓度梯度的玉米赤霉烯酮环境下，应用划痕标记染料示踪技术（SLDT） 检测细胞间隙连接通讯（GJIC ）功能，免疫荧光和蛋白免疫印迹（Western-blot）研究连接蛋白CX43,CX32表达、Western-blot研究原癌基因表达，以研究肿瘤发生机理。 （四）研究成果及成效 (2)Western-blot研究ZEA 对c-myc等表达 各浓度c-myc、c-jun表达量较对照组极都显著增加（P＜0.01），而10μg/L ZEA染毒组中c-fos表达量显著升高（P＜0.05）、20μg/L ZEA染毒组中极显著升高（P＜0.01）（图1）。 图1 不同浓度ZEA暴露对c-myc、c-fos、c-jun的影响 (3) Western-blot 研究 ZEA 对 Cx43 蛋白表达及其磷酸化水平的影响 与对照组相比，10μg/L ZEA染毒组Cx43蛋白表达显著下降（P＜0.05），20μg/L ZEA染毒Cx43表达极显著下降（P＜0.01），Cx43的磷酸化在20μg/L ZEA染毒组显著下降（P＜0.05）（图2）。 图2 ZEA对Cx43及其磷酸化水平的影响 (4) SLDT 研究 ZEA 对 GJIC 功能的影响 结果发现，随着ZEA浓度的升高，LY在细胞中的扩散距离逐渐缩小（图3），在10μg/L 和20μg/L ZEA染毒组LY的扩散距离较对照组极显著下降（P＜0.01）。 荧光显微镜观察到10、20μg/L染毒组荧光黄（LY）在细胞间的扩散距离较对照组有极显著下降（P＜0.01）；ZEA染毒后，分布于细胞膜上的Cx43逐渐减少，出现在细胞质和细胞核上。 (5) 免疫荧光研究 ZEA 对细胞内Cx43分布影响 * 兽医学院 College of Veterinary Medicine, Yangzhou University Copyright ? 2013 Yangzhou University 2015