基因的表达与调控02.pptVIP

cAMP 下降，CAP就不能与控制区结合，RNA聚合酶就不能启动转录。因此，葡萄糖降低cAMP水平的作用，实际上是使相关操纵子表达所需的调控因子失活，使操纵子不能表达。 CAP 因子可与DNA 结合，从每个正常发挥作用的启动子上都能分离到cAMP-CAP-DNA复合物。CAP 因子是由二个相同亚基构成的二聚体，能被单个分子cAMP 激活。一个CAP 亚基含有一个DNA 结合域和一个转录激活域。 CAP的共有序列中含有非常保守的五聚体 TGTGA 及一个该序列的反向序列 (有时出现) (TCANA). CAP结合在DNA的固定位点 CAP蛋白可在不同位点与 RNA 聚合酶结合 相对于启动子的位置，CAP的结合位点是高度可变的。 CAP与RNA聚合酶具体的反应依赖于CAP结合位点与启动子的相对位置。 由于Plac是弱启动子，单纯因乳糖的存在去阻遏使lac操纵子转录开放，还不能使细胞很好利用乳糖，必须同时有CAP来加强转录活性，细菌才能合成足够的酶来利用乳糖。 lac操纵子的强诱导既需要有乳糖的存在，又需要没有葡萄糖可供利用，通过CAP的正调控作用，细菌才能充分利用乳糖。 半乳糖（gal)操纵子 ----双启动子模型 半乳糖（gal)操纵子 大肠杆菌半乳糖操纵子(galactose operon)包括3个结构基因：?? 半乳糖表面异构酶(galactose epimerase ,galE)，半乳糖-磷酸尿嘧啶核苷转移酶(galactose transferase, galT)，半乳糖激酶(galactose kinase, galk)。 这3个酶的作用是使半乳糖变成葡萄糖-1-磷酸。GalR与galE、T、K及操纵区O等离得很远，而galR产物对galO的作用与lacI-lacO的作用相同。 不同于lac操纵子,没有葡萄糖时可以被诱导,有葡萄糖存在时gal也能被诱导，因此认为gal中可能存在两个启动子。 Gal操纵子的 结构特征 gal操纵子有两个启动子，PG1和PG2。两个RNA聚合酶结合位点 S1和 S2（转录起始点）mRNA可以从两个不同的起始点开始转录。 它有两个O区，一个在P区上游 –67~-73，而不是在P区与结构基因之间，另一个O区在结构基因galE内部。 CAP对gal操纵子的作用 从S1起始的转录只有当培养基中无葡萄糖（G）时才能进行（与Lac操纵子同）。 从S2起始的转录要依赖于葡萄糖，高水平的CAP能抑制从S2的转录，当有CAP时，转录从S1开始，无CAP时，转录从S2开始。 * 第四部分 操纵子 －－操纵子（operon）是指启动基因、操纵基因和一系列紧密连锁的结构基因的总称，是原核生物转录的功能单位。 原核生物基因调控一般执行如下规律：A.一个体系需要时被打开，不需要时被关闭； B.基因的开与关是相对的； C.开-关的活性可以通过转录水平上进行调节。 操纵基因是DNA上阻抑物结合、阻碍邻近启动子的启动而抑制转录的位点。 阻遏蛋白与DNA或RNA上的操纵基因结合，从而分别抑制转录或翻译。结构基因编码RNA或蛋白质(包括结构蛋白、酶和调控蛋白）。调控基因则通过编码蛋白质或RNA来调节其它基因的表达。 顺式作用元件(cis-actingelement)：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控。顺式作用元件本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用。 反式作用因子(trans-acting factor) ：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质或RNA。 表达调控最简单的模型 调控基因编码的蛋白质作用于DNA的靶位点上。 负转录调控（ negative trnscription regulation) 调节基因的产物是阻遏蛋白。 转录调控的两种方式 正转录调控（positive transcription regulation) 调节基因的产物是激活蛋白 转录调控的两种方式 代谢产物对基因活性的调节 诱导调节 是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由关---开。 诱导调节 阻遏调节 基因是开启的，但由于一些特殊代谢物或化合物的积累将其关闭。 负转录调控 负控诱导：阻遏蛋白与效应物结合时基因转录。 负控阻遏：阻遏蛋白与效应物结合时，基因不转录。 正转录调控 正控诱导： 有效应物时，激活蛋白处于活性状态基因转录。 正控阻遏：有效应物时，激活蛋白处于无活性状态基因不转录。 乳糖操纵子 法国