分离技术(电子科技大学).ppt

天然产物分离技术 大孔树脂在贯叶金丝桃提取物制备中的应用 贯叶金丝桃 80％乙醇提取物 正己烷 脱脂 乙酸乙酯提取 黄酮和双萘醌 残渣 溶于水 D101树脂 水洗脱 除去杂质 95％乙醇洗脱 总黄酮 贯叶金丝桃 Hypericum perforalurn 抗抑郁、抗病毒 天然产物分离技术 特点 a. 与传统的PTLC比较 b. 效率 50 mg ~ 0.5 g 1h c. 优点 制备型OPLC 联机检测，分段收集 应用 氨基酸，多肽，胡萝卜素，生物碱等 天然产物分离技术 离心薄层色谱（Centrifugal TLC） 简介 CTLC是在TLC和柱色谱基础上发展起来，利用 旋转离心力，连续洗脱。 装置 倾斜盘，流动相中央进入 梯度、UV检测、N2保护 固定相 活化 反复使用 天然产物分离技术 天然产物分离技术 天然产物分离技术 天然产物分离技术 天然产物分离技术 天然产物分离技术 特点 优点：（1）快速 30 min （2）流动相少 （3）可反复使用 （4）进样方便 （5）直接洗脱 （6）直接检测，接收灵活 （7）可梯度洗脱 （8）占地小，移动方便 （9）分离杂质少 缺点：（1）固定相限制 （2）Rf值 （3）显色 （4）收集污染 （5）上样量少 应用 生物碱，人参皂苷 纸色谱（PC） 天然产物分离技术 简介 纸色谱属于液-液分配色谱。纸色谱使用滤纸作为载 体，附着在纸上的水是固定相。样品溶液点在纸上, 作为展开剂的有机溶剂自下而上移动，样品混合物 各组分在水-有机溶剂两相发生溶解分配，并随有机 溶剂的移动而展开，达到分离的目的。 使用范围 纸色谱在糖类化合物、氨基酸和蛋白质、天然色素 等有一定亲水性的化合物的分离中广泛的应用。 天然产物分离技术 特点 纸色谱的操作与薄层色谱很相似，只是纸色谱的载 样量比薄层色谱更小些。 设备 滤纸 层析筒 天然产物分离技术 分离方法---柱色谱 常压柱色谱 吸附性柱色谱 分配性柱色谱 植物有效 柱色谱 离子交换柱色谱 成分分离 凝胶过滤柱色谱 主要手段 聚酰胺柱色谱 大孔吸附树脂 天然产物分离技术 吸附性柱色谱 填料 Silica gel（100~200目/200~300目）， Al2O3 生物碱 亲水性 Al2O3 甾体 脂溶性 Silica gel 挥发油 脂溶性 天然产物分离技术 柱子规格的选择 径高比：1:10 ~ 1:20 体积：硅胶的溶胀系数 色谱条件的选择 a. 最佳分离度 b. 最多的斑点数目 c. 能够找到适合的梯度 d. 起始Rf在0.15~0.2之间 天然产物分离技术 装柱 Al2O3：吸附剂:样品 (20~50:1) Silica：吸附剂:样品 (5~50:1) 1) 干法 与TLC吻合度较好，溶剂消耗少 2) 湿法 紧密，空隙小，前沿整齐 上样 1) 湿法 少量溶剂溶解上样 (低极性溶剂，CHCl3) 2) 干法 低极性溶剂溶解性差， 干法拌样： 将水浴锅置于通风厨中，温度控制在70度左右, 将蒸发皿中放入少量吸附剂 (5~10倍)，慢慢滴 加样品溶液，不断搅拌，待溶剂挥发后，再加 入样品溶液，直到样品全部被吸附剂吸附，挥干 天然产物分离技术 洗脱 等度洗脱 梯度洗脱 收集与检查 等量收集 TLC检查 合并 系统分离和目的性分离 根据目的不同而不同 天然产物分离技术 聚酰胺柱色谱 简介 聚酰胺（poliamide）吸附属于氢键吸附， 是一种用途十