葛根素对2型糖尿病大鼠的膀胱保护作用.docVIP

精品论文 参考文献 葛根素对2型糖尿病大鼠的膀胱保护作用 曾祥建 万芙蓉 冯建华 邓丽萍 乐有为（深圳市龙岗中心医院 518116） 【摘要】目的 研究葛根素对糖尿病大鼠的膀胱保护作用。方法 SD大鼠分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病大鼠葛根素干预组三组。以高糖高脂饮食及小剂量连脲佐菌素（30mg/kg）制备2 型糖尿病大鼠模型。16 周后光镜下观察膀胱逼尿肌在常规HE染色和石蜡切片明胶镀银染色的改变。结果 糖尿病组大鼠与正常对照组差异明显，治疗组较糖尿病组明显下降。结论 在2型糖尿病大鼠中，葛根素具有保护膀胱逼尿肌功能。 【关键词】糖尿病 糖尿病膀胱病 葛根素 【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）15-0027-02 糖尿病膀胱病(Diabetic cystoPathy，DCP)亦称为糖尿病神经原性膀胱（Diabetic Neurogenic Bladder，DNB）、是糖尿病引起的泌尿系统一种严重并发症。DCP是糖尿病患者的常见病发症，其发病率约为25％～85％[1]。DCP的发病率与患者的年龄及性别没有直接关系，发病率随着糖尿病疾病的病程延长而增加，糖尿病患者10年病程大约有25%的发生率，超过25年的则发病率大于50%[2]。DCP膀胱结构的改变以及神经病变是目前公认的DCP病因，因此通过葛根素作用于实验性糖尿病大鼠，研究经过葛根素治疗后糖尿病大鼠膀胱逼尿肌形态的变化情况，为防治糖尿病膀胱病寻求一种良好的途径。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验大鼠 Sprague Dawley （SD）雌性大鼠40只(暨南大学医学院动物中心提供)，体重200g-250g，经12：12h光照和黑暗循环以及充足的水和食物适应性喂养1周后用于实验。 1.1.2 标准大鼠饲料、高糖高脂饲料（提供公司 沈阳嘉乾程生物科技）；链脲佐菌素（STZ）（提供公司 SIGMA公司）。 1.2 方法 1.2.1 T2DM大鼠模型的建立及实验分组 SD雌性大鼠40只经12：12h光照和黑暗循环以及充足的水和食物适应性喂养1周后随机分为正常对照组(16只)、糖尿病组(24只)。正常对照组喂养标准大鼠饲料，糖尿病组喂养高糖高脂饲料（其中含蔗糖10%，熟猪油15%，胆固醇2%，胆酸0.25%），喂养4 周后糖尿病组空腹18-24 小时腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ）30mg/kg（用前以PH4.4 0.1mol/L 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液配成0.75%的浓度），正常对照组仅注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。注射STZ 后的第4 周，选择空腹血糖大于正常大鼠空腹血糖+3个标准差，且胰岛素敏感性降低者确定为T2DM大鼠纳入实验。对照组给普通饲料，腹腔内注射等体积的枸橼酸缓冲液。连续4周尾静脉血葡萄糖浓度gt;16.7 mmol/L，模型成功24只。在模型成功的Ⅱ型糖尿病大鼠中随机再分为糖尿病无干预组（12只），葛根素干预组（12只），葛根素按80mg/kg 每日腹腔注射1次。对照组正常饲料喂养。16周后制备逼尿肌标本进行光镜观测。 1.3 标本的收集与处理 大鼠分别于糖尿病组大鼠的实验终体重和空腹血糖值。处死后测量膀胱湿重，并用膀胱湿重与相应大鼠体重的比值作为膀胱相对重量。 1.4 标本的制备及观察方法 常规苏木素-伊红(HE)染色、常规石蜡切片明胶镀银染色，在低倍镜和高倍镜下观察苏木素-伊红(HE)染色下膀胱粘膜、固有层及膀胱肌层异同。常规观察，实验组与对照组对照观察。石蜡切片明胶镀银染色中观察神经纤维的改变情况。 1.5 统计学处理结果 应用SPSS13.0统计软件包进行数据分析，以均值plusmn;标准差（x-plusmn;s）表示，组间比较应用方差分析。 2 结果 2.1.1 苏木素-伊红(HE)染色 正常组：低倍镜下对照组可见膀胱粘膜皱襞明显，上皮移行细胞排列均匀，核圆形位于细胞中央，一般分为2-3层，固有层血管神经多见，肌层增厚，可见纵形肌，环形肌，平滑肌横断以及纵行切断的肌束排列整齐。肌束之间结构紧密，间隙可见大量结缔组织。少许紊乱，肌束体积增加外形饱满。肌束间隙明显增宽，间隙间可见少量胶原纤维。糖尿病组以上所述形态改变较治疗组明显变重，膀胱粘膜皱襞较前明显减少，上皮细胞厚度减小，固有层血管减少、胶原增加，逼尿肌基底层明显变薄，逼尿肌肌束排列较紊乱，肌束外形明显体积。肌束之间间隙加大，间隙间血管神经减少，肌束间胶原纤维增多。 2.1.2 石蜡切片明胶镀