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基因重组和基因工程GeneticRecombinationandGenetic

    第十四章 基因重组和基因工程 Genetic Recombination and Genetic Engineering      第一节 自然界的 基因转移和重组          自然界的基因转移和重组是基因变 异和物种进化的基础。也在繁殖、病毒 感染、基因表达以及癌基因激活等过程 中起重要的作用。   人们正是对自然界基因转移和重组 的认识,才发展起DNA重组技术。     一、接合作用(conjugation)  当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接 触时,质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至 另一细胞(细菌)的DNA转移称为接合作用。                   二、转化作用(transformation)    通过自动获取或人为地供给外源DNA, 使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型。     三、转导作用(transduction)     当病毒从被感染的细胞(供体) 释放出来,再次感染另一细胞(受体) 时,发生在供体细胞与受体细胞之间 的DNA转移及基因重组。                    四、转座(transposition)    大多数基因在基因组内的位置是固 定的,但有些基因可以从一个位置移动 到另一位置。这些可移动的 DNA序列包 括插入序列和转座子。由插入序列和转 座子介导的基因移位或重排称为转座。     (一)插入序列转座 插入序列(insertion sequences,IS): 长750 ~ 1500bp 组成: 反向重复序列:9~41bp,位于两侧 转座酶编码基因:产物引起转座,位于中间 正向重复序列:4~12bp,位于反向重复序列 外侧,为插入序列所特有     插入序列转座: 1. 保守性转座  从原位迁至新位 2. 复制性转座  插入序列复制后,一个复制本迁到 新位,另一个保留在原位。             (二)转座子转座   转座子(transposons):可从一个染色体 位点转移到另一位点的分散重复序列。  反向重复序列 组成 转座酶基因  特殊基因:如抗生素抗性基因等     五、基因重组    在转化、转导或转座过程中,整段 DNA在细胞内、细胞间或不同物种间 进行转移,并发生DNA分子间的共价 连接,简称重组(recombination)。     (一)位点特异的重组 由整合酶催化,在两个DNA序列的 特异位点间发生的整合。 例如:?噬菌体的整合酶识别噬菌体 DNA 和宿主染色体的特异靶位点,而 后发生的选择性整合。     (二)同源重组 发生在同源序列间的重组。同源 重组不依赖特异DNA序列,而依赖 同源性。    同源重组需要一些重组蛋白和酶。 如Rec A、B、C、D及DNA连接酶等。         * *

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