胚胎工程的应用及前景(王永旭制作)PPT.ppt

二、胚胎分割 切割同卵双驹 优势:可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。 切割同卵双犊和三卵六羔羊 胚胎分割的基本过程 胚胎移入培养液 分割胚胎（机械法、酶处理） 移植胚胎给受体 着床产仔 良种繁育 良种牛 胚胎分割过程示意图 胚胎移植 将早期胚胎 细胞分散 2.特点：后代具有相同的遗传物质，克隆。 3.理论基础：动物胚胎细胞的全能性。 4.选择的胚胎： 发育良好的、形态正常的桑椹胚或囊胚。 5.使用的主要仪器及工具： 实体显微镜、 显微操作仪、 分割刀、 分割针。 6.具体操作： 用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。 7.操作注意事项： ①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞 团均等分割。 ②胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移 植的成功率也越低。 在显微镜下 切割胚胎 取样滋养层 做DNA分析 性别鉴定 已知性别胚胎 胚胎移植 分割针 囊胚腔 透明带 滋养层 内细胞团 内细胞团 分割针 二分胚 牛胚胎性别鉴定和分割示意图 8.胚胎分割技术的缺陷 （1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异； （2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。 旁栏思考题： 内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。 胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移 植的成功率也越低。 早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的。分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低。 三、胚胎干细胞 1.概念：简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或 原始性腺中分离出来的一类细胞。 内细胞团细胞 (ICM) 全能细胞 受精卵 囊胚 胎儿 胚胎干细胞分离途径示意图 生殖腺细胞 胚胎干细胞分离培养 2.特点: 1)形态：体积小、细胞核大、核仁明显。 2)功能：具有发育的全能性；可分化为成年动物体内 任何一种组织细胞；体外培养可增殖不分化。 3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分 化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。 3.主要用途 (1)治疗人类的某些顽症 (2)培育出人造组织器官，用于器官移植 (3)是研究体外细胞分化的理想材料 (4)用于对哺乳动物个体发生和发育规律的研究。 全能干细胞 囊胚 受精卵 培养未分化 干细胞 全能性 神经细胞 血细胞 全能性 心肌细胞 8细胞胚胎 胚胎干细胞培养 × ♂ ♀ 分离早期胚胎 早期胚胎 转入培养皿中培养 分离内细胞团 胰蛋白酶处理解离 加饲养层细胞培养 胚胎干细胞 不加饲养层细胞培养 胚胎干细胞 细胞分化 从鼠的早期胚胎培养胚胎干细胞 胚胎干细胞核移植： 指把胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 （繁殖多个个体） 专题3 胚胎工程 3.3 胚胎工程的应用及前景 胚胎移植 采集卵母细胞 体外培养 采集精子 体外获能 体外受精 早期胚胎培养 受体牛 小 结 （时期： ） 1）超数排卵（试剂） 2）活体取卵（仪器） 3）从屠宰的卵巢取卵 方法①②③ （方法，试剂） （试剂） （培养条件、目的阶段） 成熟的卵子 获能的精子 MII中期 方法 1.胚胎移植概念: 将雌性动物的 ，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到 的、 的其他雌性动物的体内，使之发育为新个体的技术。 一、胚胎移植 同种 生理状态相同 早期胚胎 胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。 胚胎的来源：雌性动物的早期胚胎或体 外受精及其他方式得到的胚胎。 供体：提供胚胎的个体。 受体：接受胚胎的个体。 胚胎移植方法：手术法和非手术法。 受体的条件：同种、生理状态相同。 胚胎移植成功的标志：移植的胚胎在受体内能正常发育并分娩。 2.胚胎移植的意义 ⑴加速育种工作和品种改良； ⑵大量节省购买种畜的费用； ⑶一胎多产； ⑷保存品种资源和濒危物种； ⑸可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期，增加一生繁