雷帕霉素靶蛋白通路在七氟醚后处理保护心肌缺血再-中国循环杂志.PDFVIP

896 中国循环杂志 2016 年 9 月 第 31 卷 第 9 期（总第 219 期）Chinese Circulation Journal，September，2016，Vol. 31 No.9（Serial No.219） 基础与实验研究 蛋白激酶 B/ 雷帕霉素靶蛋白通路在七氟醚后处理保护心肌缺血 再灌注中的作用 张静，余鹏，袁林辉，陈勇，朱晓红，张列亮，周斌，周志东 摘要 目的：探讨七氟醚后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及蛋白激酶 B（AKT）/ 雷帕霉素靶蛋白（mTOR） 通路在其中的作用。 方法：取 Langendorff 离体灌注模型成功的大鼠心脏 84 个，随机分为 7 组（n =12）：假手术组（Sham 组 ）、缺血 再灌注组（I/R 组 ）、七氟醚后处理组（SPC 组 ）、NVP-BEZ235 溶剂二甲基亚砜组（DMSO 组 ）、磷脂酰肌醇 -3- 激酶 （PI3K）/mTOR 双重抑制剂 NVP-BEZ235 组（BEZ 组 ）、NVP-BEZ235 ＋七氟醚后处理组（BEZ ＋ SPC 组 ）和单纯七 氟醚给药组（SEVO 组 ）。除 Sham 组和 SEVO 组，其余各组缺血 30 min，再灌注 120 min。SPC 组、DMSO 组和 BEZ 组分别于缺血末至再灌注初 15 min 给予经 2.4% 七氟醚、DMSO（ 0.2%）和 NVP-BEZ235（20 μmol/L）饱和的 K-H 液灌注，随后更换为正常 K-H 液再灌注 105 min。BEZ ＋ SPC 组于缺血末至再灌注初 15 min 给予经 2.4% 七氟醚和 NVP-BEZ235（20 µmol/L）饱和的 K-H 液灌注。再灌注末观察各组心肌梗死范围，心肌组织病理学变化，检测蛋白 [ 磷酸化 AKT（phospho-AKT）/ 总的 AKT（total-AKT）、磷酸化 mTOR（phospho-mTOR）/ 总的 mTOR（total-mTOR）、 自噬相关基因 （Beclin1）、B6 淋巴细胞瘤 -2（Bcl-2）相关 X 蛋白（Bax）/Bcl-2 和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -3（cleaved Caspase-3）] 表达水平。 结果：与 I/R 组比较，SPC 组心肌梗死范围减少 [（26.28±4.00）% vs （49.22±3.66）%]，心肌病理损伤减轻，phospho- AKT/total-AKT 和 phospho-mTOR/total-mTOR 表达分别上调 79.85% 和 67.02%，Beclin1、Bax/Bcl-2 和 cleaved Caspase-3 表达 分别下调 33.77%、69.26% 和 48.84%（P 均 0.05）；与 SPC 组比较，BEZ ＋ SPC 组心肌梗死范围增加 [（53.85±4.06）% vs （26.28±4.00）%]，心肌病理损伤加重，phospho-AKT/total-AKT 和 phospho-mTOR/total-mTOR 表达分别下调 46.06% 和 42.95%，Beclin1、Bax/Bcl-2 和 cleaved Caspase-3 表达分别上调 29.90%、206.85% 和 114.65% （P 均 0.05）。 结论：七氟醚后处理可通过激活 AKT/mTOR 通路，抑制心肌细胞自噬和凋亡，从而减轻离体大鼠心肌缺血再灌 注损伤。 关键词 心肌缺血再灌注损伤；雷帕霉素靶蛋白；七氟醚 Effect of Sevoflurane Post-conditioning on AKT/mTOR Pathway for Protecting Cardiac Ischemia/reperfusion Injury in Isolated Rat’s Heart ZHANG Jing, YU Peng, YUAN Lin-hui, CHEN Yong, ZHU Xiao-hong, ZHANG Lie-liang, ZHOU Bin, ZHOU Zhi-dong. Department of Anesthesiology, Second Affiliated Hospital of Na