猪AnnexinA2基因真核表达载体的构建及表达-吉林农业大学学报.PDFVIP

吉林农业大学学报 2012，09 Journal of Jilin Agricultural University E-mail:jlndxb@ 猪Annexin A2 基因真核表达载体的构建及表达∗ 邢士博，曹宇航，张 田，朱 琳，陈玉珏，任林柱** 吉林大学畜牧兽医学院，长春 130062 摘 要：根据猪的 Annexin A2 基因序列设计引物，通过 PCR 方法扩增Annexin A2 基因 cDNA ，并将其克隆到pGEM-T 载体后进行测序分析，然后将测序结果正确的 Annexin A2 基因 cDNA 亚克隆到 pEGFP-N1 表达载体上，成功构建了 表达载体。将表达载体瞬时转染 Marc-145 细胞，结果表明：表达载体 pEGFP-N1-ANXA2 可以在 Marc-145 细胞中表 达。 关键词： Annexin A2 ；猪；基因；真核表达 中图分类号：S828；Q786 文献标识码：A 文章编号：1000-5684(2012) 网络出版地址： /kcms/detail/22.1100.S1429.001.html Construction and Expression of Eukaryotic Expression Vector of Porcine Annexin A2 Gene XING Shi-bo, CAO Yu-hang, ZHANG Tian, ZHU Lin, CHEN Yu-jue, REN Lin-zhu College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China Abstract: cDNA of Annexin A2 gene was amplified using porcine mRNA as template by RT-PCR, and cloned into pGEM-T vector. Then, the cDNA was subcloned into pEGFP-N1 to construct eukaryotic expression vector pEGFP-N1-ANXA2 of Annexin A2. The results of transfection showed that the eukaryotic expression vector pEGFP-N1-ANXA2 of Annexin A2 was constructed successfully. The vector can be expressed in Marc-145 cells. The result in present study will be useful in studying PRRSV infection. Key words: Annexin A2; porcine; gene; eukaryotic expression 猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and 辅助因子和特异的细胞受体（如：CD163[7] 、CD151[8] ） respiratory syndrome ，PRRS ）是由猪繁殖与呼吸综合 外，宿主内的蛋白Annexin A2 、Hsp 27 等也参与并整 征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrom 合到新生的病毒颗粒中去[9] 。在感染病毒的细胞中 virus , PRRSV) 引起以妊娠母猪严重繁殖障碍以及 Annexin A2 的表达量比未感染的细胞表达量有明显 仔猪呼吸道症状和高死亡率为特征的猪繁殖与呼吸 的提高。由此推断，在PRRSV感染宿主细胞过程中， 综合征,给世界养猪业造成了巨大的经济损失[1] 。 Annexin A2 对病毒的感染率有一定的影响。目前国内 PRRSV属于动脉炎病毒科，动脉炎病毒属，基因 外对宿主蛋白Annexin A2 在PRRSV侵染细胞的具体 组为单股正链RNA 病毒，基因组全长约