实验项目萤光光谱仪.pdfVIP

實驗項目 ：螢光光譜儀 一.實驗目的 : 1.熟悉螢光光譜儀之原理並學習其儀器之操作 。 2.利用維生素 B2與玫瑰紅進行定量分析光譜實驗。 二.原理 : 大多數分子在室溫時均處在電子的最低振動能級，稱為基態 。 當物質分子吸收了與它所具有的特徵頻率相一致的光子時 ，其電子便 由原來的能級躍遷至第一電子激發態或第二電子激發態中各個不同 振動能級其後; ，大多數分子常迅速降落至第一電子激發態的最低振 動能級 ，在這一過程中它們和周圍的同類分子或其他分子撞擊而消耗 了能量因而不發射光， 。分子在第一電子激發態的最低振動能級停留 −8 約10 秒之後 ，直接下降至電子基態的各個不同振動能級 ，此時以 光的形式釋放出多餘的能量所發生的光即是螢光， 。螢光產生的必要 條件 ，是分子對輻射的強烈吸收 ，一般以芳香性（aromatic），雜環 性 （heterocyclic），以及高度共軛性(conjugated)，並具有強烈共 振安定性的構造者較具有螢光的特性， 。此外，取代基的效應亦對螢 光有極大的影響，如表2-所示1 ，通常具有推電子或可使電子發生未 定域化的取代基會增加螢光強度；反之 ，拉電子基會降低螢光性質 ， 甚至完全抑制。 電子也可以從激發態經由系間跨越過程無輻射躍遷至能量較低且具 有不同自旋多重度的激發態 （通常為自旋三重態 ），再經由內轉換過 程無輻射躍遷至激發態 ，然後以發光的方式釋放出能量而回到基態 S0 。由於激發態和基態 S0具有不同的自旋多重度 ，這一躍遷過程是被 躍遷選擇規則禁戒的 ，從而需要比釋放螢光長的多的時間 （從 10 −4 秒到數分鐘乃至數小時不等 ）來完成這個過程；而且與螢光過程不 同 ，當停止入射光後 ，物質中還有相當數量的電子繼續保持在亞穩態 上並持續發光直到所有的電子回到基態。這種緩慢釋放的光被稱為磷 光。 輻射能量傳遞過程 (1) 振動鬆弛 （vibration energyreduction ，V）： 電子吸收輻射能由基態躍遷至激發態的高振動能階 ，由於液態 分子、氣態分子或溶劑分子的相互碰撞 ，而使較高的振動能轉變為動 能或傳給其他分子 ，使得激發電子回到激發態之最低振動能階 。 (2)螢光與磷光發射程序 ： 對於具螢光性的分子結構 ，位於激發態最低振動能階的電子 ， 極易以輻射 （radiative）方式返回基態之任一振動能階而放出螢光。 若位於 S1單一激發態 (singlestate)之最低振動能階與T1三重激發 態 (Tripletstate)之較高振動能階或較高之三重態能階重合 ，此時 電子可 能改變其自旋方向向西進入 T1，此過程稱之為系統跨越（intersystem crossing）。於T1的電子亦可以輻射方式 ，返回基態之任一振動能階 而放出磷光。在螢光及磷光放射的瞬間 ，分子的結構不應有所改變。 (3)內轉換及外轉換 ： 內轉換是指一個分子沒有經輻射的發射 ，就能轉到較低能量的 電子態的分子間過程 ，尤其以兩個電子能階非常接近而有振動 能階重疊時內轉換特別明顯 。外轉換是指 ，激發分子會因與未激發分 子或溶劑分子等其他分子相互作用而轉移能量，此時能量轉移以熱的 非輻射 （non-rediative）方式釋出。S1及T1 之激發態分子有時會 與未激發分子、或溶劑分子等其他分子相互碰撞而逐漸失去能量 ，此 時能量將以非輻射方式 (non-radiative)而放出熱，稱為外部轉化程 序(externalconversion) ，此 過程將減低螢光或磷光的效率 。 螢光光譜 或磷光光譜( ): 固定激發光波長 (選最大激發波長 ，化合物發射的螢光或磷光強度( ) 與發射光波長關係曲線圖中曲線( II或 III) 三.儀器介紹 Cary Eclipse螢光光譜儀 VarianCaryEclipse 螢光分光光度計的設計是基於最新的光學與 電子學的技術發展 ，將光譜校正功能，發射與激發濾光片 ，以及大波 長範圍(20