the third chapter protein chemistry蛋白质化学 分子生物学课件.ppt

巯基（-SH）的性质 巯基（-SH）的性质 巯基（-SH）的性质 羟基的性质 咪唑基的性质 Filter-paper Chromatography Thin-layer Chromatography HPLC 二. 蛋白质二级结构 蛋白质的二级结构：指一级结构进一步盘绕折叠，其主链形成的局部构象。 二级结构的类型：主要有?-螺旋、?-折叠、?-转角、 无规卷曲。 维持二级结构的力：主要是氢键。 影响α-螺旋稳定的因素 四、蛋白质的四级结构 3.5 蛋白质的重要性质 立体结构模型 溶菌酶分子的三级结构 胰岛素分子的三级结构 由两条或两条以上具有三级结构的多肽链 相互缔结在一起的聚合体。其中每条具有三级 结构的多肽链为一个亚基。 维系蛋白质四级结构的力是次级键。 偶数亚基，排列对称。 血红蛋白(hemoglobin)的四级结构 五、蛋白质分子中的重要化学键 1、共价键：二硫键、肽键、酯键； 2、非共价键：氢键、离子键、疏水键、和范德华力 一级结构：共价键 二级结构：氢键 三、四级结构：次级键 稳定蛋白质构象的力 盐键 氢键 疏水键 范德华力 二硫键 酯键 (一) 胶体性质 分子量很大很大的吸附力 不能透过半透膜－－透析 其水溶液是亲水胶体 （二）两性解离性质 蛋白质在等电点偏酸溶液中带正电荷， 在等电点偏碱溶液中带负电荷，在等电点 时为兼性离子。 蛋白质是人体重要的缓冲剂。 蛋白质的等电点 1、蛋白质的等电点并不是电荷最小时的pH 2、测定蛋白质等电点必须在有一定离子浓 度的适当缓冲液中进行 3、在水溶液中，蛋白质的等电点一般偏酸， 因为羧基的解离度比氨基的大。 4、等电点时蛋白质的导电性、溶解度、 粘度、渗透压等都是最小 电泳现象： 在不同的pH环境下，蛋白质的电学性质不同。 当溶液pH=等电点时， 蛋白质粒子净电荷为零，在电场中不移动； 当溶液pH＞等电点时， 蛋白质粒子带负电荷，在电场中向正极移动； 当溶液pH＜等电点时， 蛋白质粒子带正电荷，在电场中向负极移动。 （三）蛋白质的变性与复性 1、蛋白质的变性（denaturation） ： 在某些物理或化学因素的作用下，天然蛋白 质严格的空间结构被破坏（不包括肽键的断 裂），从而引起蛋白质若干理化性质和生物学 性质的改变，称为蛋白质的变性。 2、蛋白质的复性（renaturation） 蛋白质的变性如不超过一定的限度， 经适当处理后，可重新变为天然蛋白质， 这种现象称为蛋白质的复性。 与导致变性的因素、蛋白质种类、 蛋白质分子结构的改变程度相关。 核糖核酸酶的变性与复性 3、引起蛋白质变性的因素 物理因素：高温－－破坏氢键、 高压、紫外线、电离辐射、超声波等. 化学因素：强酸、强碱－－破坏盐键、 有机溶剂－－介电常数 重金属盐、去污剂、尿素 4、变性蛋白质的特征： 物理性质： 旋光性改变 溶解度下降 沉降率升高 光吸收度增加 化学性质： 官能团反应性增加 易被蛋白酶水解 生物学性质： 原有生物学活性丧失 抗原性改变 （四）凝固作用 变性蛋白质分子互相凝聚或者互相 穿插缠结成块状的现象称为凝固。 A 变性 B 聚积缠结 （五）别构作用 含亚基的蛋白质由于一个亚基的构象改 变而引起其余亚基和整个分子构象、性质 和功能发生改变的作用称别构作用，因别 构而产生的效应称别构效应。 －－详见第七章 （六）沉淀作用 因酸、醇、中性盐、重金属盐类或者 生物碱试剂的作用，蛋白质分子相互聚 集而从溶液中析出的现象称为沉淀。 变性的蛋白质不一定沉淀， 沉淀的蛋白质不一定变性。 非变性沉淀（可逆沉淀）： 等电点沉淀法 盐析法 有机溶剂沉淀法等。 变性沉淀（不可逆沉淀）： 加热沉淀 强酸碱沉淀 重金属盐沉淀 生物碱沉淀等。 （七）沉降作用 （八）蛋白质的水解 （九）蛋白质的颜色反应 双缩脲反应 双缩脲：是两分子的尿素经加热失去一分子 NH3而得到的产物。 双缩脲反应： 双缩脲 / 两个以上肽键的多肽 + 碱性硫酸铜 －→ 紫红色或蓝紫色络合物 3.6 蛋白质的结构与功能 1、蛋白质的一级结构决定其高级结构 2、蛋白质的一级结构与生物功能的关系 A 细胞色素c的种属差异与生物进化 B 镰状细胞贫血病血红蛋白 C 酶原和激素原的激活 3、蛋白质的高级结构与生物功能的关系 当血红蛋白的一个α亚基与氧分子结合→其他亚基的构象发生改变→对氧的亲和力增加→整个分子的氧结合力迅速增高→血红蛋白的氧饱和曲线呈“S”形。这种由于蛋白质分子构象改变而导致蛋白质分子功能发生改变的现象称为变构效应。 血红蛋白 3.7 蛋白质的修饰 天然的或者人工的对组成蛋白质 的氨基酸残基或基团作某种改变。 如酶原、激素原的激活。 3.8 糖蛋白和脂蛋白 糖蛋白：糖同蛋白质以共价键