铜绿假单胞菌的医院感染分布及耐药性分析.docVIP

精品论文 参考文献 铜绿假单胞菌的医院感染分布及耐药性分析 中山大学附属第三医院检验科 广东广州 510630 　　[摘要]目的 通过统计分析2012-2014年铜绿假单胞菌在我院的分布情况，了解铜绿假单胞菌医院感染的特点。根据药敏试验结果分析我院的铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性，从而指导临床用药及预防感染。方法 将送检合格的细菌分离及培养按照《全国临床检验操作规程》(第3版)进行，采用SIEMENS公司 MicroScan WalkAway96 plus鉴定药敏分析仪，药敏结果按照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)（2013版）标准进行结果判断。筛选出45株铜绿假单胞菌采用E-test法进行最低抑菌浓度（MIC）的检测和CCCP对MIC影响试验。采用SPSS 13.0完成数据的统计分析,计数资料采用X2检验。结果 铜绿假单胞菌主要来源于痰，其次为分泌物、尿液等。易感人群为中老年人及有基础疾病等抵抗力低下人群。铜绿假单胞菌的耐药机制主要是产金属beta;-内酰胺酶和主动外排系统亢进。结论 铜绿假单胞菌主要引起呼吸道、伤口、泌尿道感染，中老年人和长期住院等免疫力低下的人为易感人群。铜绿假单胞菌具有较强耐药性，主动外排系统表达亢进在铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药起重要作用。外排泵抑制剂在多重耐药铜绿假单胞菌的治疗中具有一定的应用前景，但目前仍主要以严格监控临床上抗生素的使用情况，减少多重耐药铜绿假单胞菌的出现。 　　[关键词]铜绿假单胞菌 院内分布 耐药性 　　铜绿假单胞菌属条件致病菌，是医院感染的主要病原菌之一。具有分布广泛、多途径传播、易感染等特点。在由各种原因所致的人体抵抗力低下时引起呼吸道感染、泌尿道感染、外伤感染等。近年来，由于广谱抗菌药的广泛使用，该菌的检出率和耐药性出现上升的趋势,但这种趋势在近年来有轻微的下降趋势[1]。除此之外，该菌的耐药性随着各地医院的用药情况不同而有所差异。铜绿假单胞菌的耐药性分析方面，国内外的研究结果大致相同[2][3]。铜绿假单胞菌的耐药机制主要有：产生金属beta;-内酰胺酶（MBL），主动外排系统亢进，OprD2蛋白缺失等。国内由于广谱抗菌药的广泛使用，本文统计分析2012-2014年我院检出的铜绿假单胞菌的分布情况，并从2014年检出的铜绿假单胞菌中筛选出45株进行耐药机制的检测，根据实验反映的铜绿假单胞菌的耐药情况协助规范临床抗生素的使用。 　　1.材料与方法 　　1.1 菌株来源 　　菌株来源于我院2012年3月-2014年10月住院患者的痰、尿、血液、脓液、分泌物等其它标本，剔除同一患者同一部位重复分离菌株后筛选出45株进行实验。所有菌株经SIEMENS公司 MicroScan WalkAway96 plus鉴定药敏分析仪鉴定确认。质控株铜绿假单胞菌ATCC27853购自卫生部临床检验中心。 　　1.2 仪器与试剂 　　1.2.1所用仪器 　　 MicroScan WalkAway96 plus鉴定药敏分析仪（SIEMENS公司）， 　　1.2.2抗菌药物及试剂 　　(1)MBL E-test纸片（非发酵菌金属酶检测用）：生物梅里埃中国有限公司（BIOMERIEUX）生产。 　　(2)空白纸片和亚胺培南药敏纸片：均为为英国OXOID公司生产。 　　(3)CCCP和EDTA均为Sigma公司产品。 　　(4)M-H琼脂培养基由江门市凯林贸易有限公司生产。 　　2.方法 　　2.1 最低抑菌浓度（MIC）的检测 采用E-test法。用接种环在琼脂平板上挑取形态相近的铜绿假单胞菌菌落4-5个，接种于5ml生理盐水中，配置成0.5麦氏标准比浊浓度菌液，于15min内，用无菌咽拭子取菌液，在管壁上挤去多余液体后均匀涂布M-H琼脂平板上，用消毒好的镊子夹取E-test纸片，贴在平板中央。35℃孵箱18-24h后观察结果。参照2008年CLSI解释标准判定敏感、耐药、中介，质控菌株为铜绿假单胞菌ATCC27853。判断标准：IP/IPIge;3倍稀释度为阳性，表示待测菌株产MBL。 　　2.2 CCCP对MIC影响试验 与上述MIC检测试验同时进行。配制0.5麦氏单位的铜绿假单胞菌菌悬液和浓度为5mg/L的CCCP溶液。将菌悬液和CCCP溶液按1：1的比例混合均匀。采用E-test法测定CCCP存在情况下亚胺培南对铜绿假单胞菌的MIC值，同时接种只含上述浓度CCCP的M-H琼脂平板作为生长对照。加入CCCP前后同一菌株对亚胺培南MIC降低ge;4倍提示主动外排机制存在。 　　2.3 多重耐药铜绿假单胞菌的筛选 分离出的铜绿假单胞菌至少对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、beta;-内酰胺类、碳青霉烯类中3类或以上抗菌药物同时耐药判定为多重耐药铜绿假单胞菌。 　　2.4 统计方法