第04章_核酸之3-5.pptVIP

第四章　核酸;一、DNA一级结构;（2）字母式书写 ???? ?① 5’ -pApCpGpTpAOH-3＇ ?? ??? ② 5’ -ACGTA-3＇;3、一级结构的测定(测序);;;同一生物的不同组织的DNA碱基组成相同； 同一种生物DNA碱基组成不随生物体的年龄、营养状态或者环境变化而改变； 几乎所有的DNA，无论种属来源如何，其腺嘌呤摩尔含量与胸腺嘧啶摩尔含量相同[A] = [T]，鸟嘌呤摩尔含量与胞嘧啶摩尔含量相同[G] = [C]，总的嘌呤摩尔含量与总的嘧啶摩尔含量相同[A]＋[G]=[C]＋[T]。 不同生物来源的DNA碱基组成不同，表现在A＋T/G＋C比值的不同。这些结果后来为DNA的双螺旋结构模型提供了一个有力的佐证。;;（二）?DNA的二级结构——双螺旋结构;两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕进行右手螺旋。 碱基位于双螺旋内侧，磷酸和戊糖相间排列组成骨架，位于外侧。 螺旋平均 d＝2 nm，碱基堆积距离0.34 nm，相邻核苷酸之间夹角为36?，每旋转一周包含10碱基对(base pair，bp)，每周高度3.4 nm。;两条链的碱基之间互补配对方式为：A→T, C→G。 双螺旋表面有大沟（major groove）和小沟（minor groove）： 大沟：宽1.2 nm，深0.85 nm 小沟：宽0.6 nm，深0.75 nm ;碱基配对的结构;3.4 nm; DNA结构双螺旋结构的提出，被认为是本世纪生命科学史最重要的贡献之一，同时也是自然科学史上的重大贡献。它直接解释了生物遗传信息的传递与表达的规律，使生命科学从此进入一个崭新的时代即分子生物学时代。;2、DNA双螺旋结构的稳定因素;(三) DNA二级结构的多态性;;1. DNA双螺旋的不同构型;;;⒉ 与DNA碱基顺序相关的特殊二级结构;核酸分子中的回文序列;单链的回文序列可形成发卡结构;双链回文序列可形成十字架结构;（2） 镜象结构 ; 　多嘌呤-多嘧啶的镜象序列可形成三螺旋结构(H-螺旋或 Hoogsteen 螺旋)：该螺旋常处在许多真核细胞基因的表达调节区。可能与基因表达的调节有关。;3、三链与四链DNA;?三、?DNA的三级结构和真核细胞?DNA的组装;有些单链环形染色体(如φ×174)或双链线形染色体(如噬菌体λ )，在其生活周期的某一阶段，也必将其染色体变为超螺旋形式。 对于真核生物来说，虽然其染色体多为线形分子但其DNA均与蛋白质相结合，两个结合点之间的 DNA 形成一个突环(loop)结构，类似于CCC分子，同样具有超螺旋形式。; 超螺旋按其方向分为正超螺旋和负超螺旋两种。真核生物中，DNA与组蛋白八聚体形成核小体结构时，存在着负超螺旋。研究发现，所有的DNA超螺旋都是由DNA拓扑异构酶产生的。;;(二) 真核细胞染色体的组装 ; 两个核心颗粒之间由一段双螺旋DNA链(约60 bp)相连，称为连接部。组蛋白H1结合在此部位。;核小体结构 ;;;染色体组装的层次;第四章　核酸;????四、RNA的分子结构 ;二级结构：茎环，发夹结构;结构特点： 分子大小约为25 kD，4 S，70 - 90 bp。 5’ 端多为pG，3’端均为CCA-OH，用来接受活化的氨基酸。;3. 二级结构为四环四臂（也称为茎）的三叶草型结构;tRNA的?三级结构： 倒L形;(三) rRNA的分子结构 1、含量最丰富，约占总RNA的80%。 2、rRNA的种类与大小;3、rRNA的二级结构与三级结构没有固定的模式;4、rRNA的功能是构成核糖体，在蛋白质的合成中起着催化肽键形成的作用。;;(四) mRNA的分子结构特点;2、真核生物;编码区两端存在非编码区，即其基因是外显子(exon)和内含子(intron)相间排列的结构。;核苷酸上存在修饰成分，例如甲基化，磷酸化等。 转录方式为后转录，即翻译在转录之后进行，两者是独立分开;第四章　核酸;一、物理性质 形态：DNA结晶为白色纤维状，RNA结晶为白色粉末状。 溶解性：DNA，RNA都微溶于水，不溶于有机溶剂，例如乙醇 大小：DNA约为 5×103～1.2×108 bp，分子量约为3.3×103～8×1010 kD；RNA约为几十到上千bp，分子量约为几万到几十万道尔顿。 等电点：DNA pI＝2.0～2.8，RNA pI＝4～4.5;二、紫外吸收性质 　　由于核苷酸具有共轭双键，所以核酸在 260 nm处有最大吸收值。 ＝2????? 为 RNA ?A260/A280? ??＝1.8?? 为 DNA ???????????????????　＜1.8?? 为含有蛋白质，核酸的混合物;三、