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第1章食品生物技术概论
原核细胞的基因结构 RNA聚合酶的作用是催化DNA转录为RNA。它能够识别调控序列中的结合位点,并与其结合。转录开始后,RNA聚合酶沿DNA分子移动,并与DNA分子的一条链为模板合成RNA。 真核细胞的基因结构 与原核细胞比较,真核细胞基因结构的主要特点是: 编码区是间隔的、不连续的。也就是说,能够编码蛋白质的序列被不能够编码蛋白质的序列分隔开来,成为一种断裂的形式。 其中,能够编码蛋白质的序列叫做外显子,一般不能够编码蛋白质的序列叫做内含子。 真核细胞的基因结构 真核细胞基因 编码区 (间隔、不连续) 外显子:能编码蛋白质的DNA序列 内含子:不能编码蛋白质的DNA序列 非编码区:与原核生物具有相似功能的启动子、终止子 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 原核细胞 真核细胞 不同点 编码区是 连续的 编码区是间隔的、不连续的 相同点 都由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成的 基因的基本组成部分 编码区――包括起始密码子,终止密码子和氨基酸密码子; 非编码区――5’-末端非转译区,3’-末端非转译区,真核基因 的间隔区; 启动区――RNA聚合酶结合部位,由此启动基因的转录作用; 终止区――具有终止转录作用的功能。 不管是真核基因还是原核基因,都具有如下4个基本的组成部分: 基因的种类 (1)编码蛋白质的基因:包括结构基因和调节基因。 (2)没有转译产物的基因:如rRNA基因和tRNA基因。 (3)不能转录的DNA片段:如操纵基因。 启动子与终止子 启动子是在非编码区内紧靠转录起点,调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列,它能引导RNA聚合酶与正确的基因部位结合,使转录从起点开始,沿编码区进行。 终止子是在非编码区内紧靠转录终点,调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列,它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来,使转录终止。 (1)基因 基因是遗传信息的基本单位。 基因是一种物理实体,是一种化学分子,通过改变这个分子的结构可以改变基因的信息内容,从而改变相应的生理功能。 基因通过指导蛋白质或RNA分子的产生,或者通过影响其他基因产生这些产物的方式来发挥其生理功能。 八.基因及基因工程的概念 在染色体或DNA分子上,基因呈线性排列,并非所有的DNA序列都是基因,而只有其中某一特定的多核苷酸区段才是基因的编码区,因此基因是有特定功能的DNA片段。一般来说,一个基因大约含有1500个核苷酸对,基因本身也具有线性结构。 (2)基因组(Genome) 基因组是指一个物种的单倍体的染色体所携带的全部基因。 对于多数只有一个染色体的原核生物来讲,如细菌、噬菌体它的整个染色体所包含的全部基因组成其基因组。但对于通常的二倍体高等生物来讲是指能维持配子或配子体正常功能的最低数目的一套染色体所包含的全部基因。 七.基因及基因工程的概念 (3)基因工程(geneticengineering) 以分子遗传学为基础,在体外对DNA进行切割、拼接, 使遗传物质重新组合, 经载体转移到细胞中扩增表达, 获得人类所需产品, 或组建新生物类型的技术。 除了少数RNA病毒外,几乎所有的基因都存在于DNA结构中,而用于外源基因重组拼接的载体也都是DNA分子,因此基因工程也称为重组DNA技术(DNA Recombination)。 DNA重组分子大都需在受体细胞中复制扩增,故还可将基因工程表征为基因克隆(Gene cloning)或分子克隆(Molecular cloning)。 基因工程的基本特点是,分子水平操作,细胞水平表达。 (4).与基因工程相关的概念: 1.克隆(clone,cloning): 原意是指单细胞纯系无性繁殖。通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。获取这一群体的过程称为克隆化(cloning)。 现代概念是是按人类的意愿,在体外对DNA分子进行重组,再将重组分子导入受体细胞,使其在细胞中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝的技术。由于整个操作在分子水平上进行,所以称为分子克隆(molecularcloning)。 2.重组DNA技术(DNArecombinationtechnique) 是用酶学的方法将不同来源的DNA在体外切割,连接组成一个杂合的DNA分子的技术。基因工程包括DNA重组技术。 基因工程至少需要3种工具: 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” DNA连接酶——“分子缝合针” 基因进入受体细胞的运载体——“分子运输车” 一.限制性核酸内切酶 (一)限制酶的概念(定义,分类,命名,限制与修饰辨正关系)
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