聚碳酸乙烯撑酯与双端氨基聚乙二醇交联体系固定化酶载体的合成与表征.pdfVIP

V o l. 22 高 等 学 校 化 学 学 报 　N o. 4　 2 0 0 1 年 4 月 　 　　　　　　CH EM ICAL JOU RN AL O F CH IN E SE U N IV ER S IT IE S　　 　　　　　　　 678～ 682　 聚碳酸乙烯撑酯与双端氨基聚乙二醇交联体系 固定化酶载体的合成与表征 黄家贤　丁伦汉　曹　　　李　悦　蒋　艳 (南开大学化学系, 离子交换与吸附国家重点实验室, 天津 30007 1) 摘要　将聚碳酸乙烯撑酯( ) 与 , 双端氨基聚乙二醇( ) 溶于 , 于液蜡中进行交联 PV CA H N PE G N H DM F 2 2 反应制得亲水性固定化酶载体, 将其与胰蛋白酶进行偶联反应制备了固定化胰蛋白酶. 酶蛋白的比活力及 其于载体上的结合量与反应条件有关, 当 ( ) ( ) 为 0 5 时, 二者均处于最高值. 此 w PV CA w H N PE G N H 2 2 固定化酶酶促反应的最适pH 值和 K m 值均较之溶液酶有显著提高, 但二者的最适酶促反应温度却相当一 致. 关键词　聚乙二醇; 聚碳酸乙烯撑酯; 固定化酶; 载体; 胰蛋白酶 ( ) 中图分类号　 63 1　　　　文献标识码　 　　　　文章编号　025 10790 200 1 O A [ 1, 2 ] [ 1 ] PV CA 可用于制备酶等生物活性物质固定化载体 . Ch en 等 将 PV CA 用双端氨基环醚和乙醇 氨等进行交联制备载体. 本文参照文献[ 3～ 7 ] 的方法, 合成了具有良好的生物组织相容性、不易降解 且易于由肾脏排出 , 将其与 进行交联反应, 制得亲水性显著改善的珠状载体, H 2N P E G N H 2 PCV A 其与酶分子之间系以结合力很强的共价键相连, 不易脱落, 较其它方法[ 8, 9 ] 方便可靠. 1　实验部分 1. 1　实验材料 聚乙二醇 800, 1 000 和 2 000 经羟值分析[ 10 ] 实测分子量分别为 770, 1 040 和 1 960 (上海活性试剂 ) ( ) 采购供应站 , 四氢呋喃和吡啶 天津市试剂研究所 均为分析纯, 使用前用活化的 04