桂花树内生真菌的分离及其抗氧化抑菌活性.PDF

第３４卷 第１期 桂 林 理 工 大 学 学 报 Ｖｏｌ３４Ｎｏ１ ２０１４年２月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｆｅｂ　２０１４  文章编号：１６７４－９０５７（２０１４）０１－０１３８－０８　　　　　 ｄｏｉ：１０３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ１６７４－９０５７２０１４０１０２３ 桂花树内生真菌的分离及其抗氧化抑菌活性 ａ ｂ ｂ ｂ 李海云 ，阮贵华 ，李子院 ，余艳葵 （桂林理工大学 ａ广西矿冶与环境科学实验中心；ｂ化学与生物工程学院，广西 桂林　５４１００４） 摘　要：采用组织贴片培养分离法，分别从桂花树的花、叶、枝等健康组织中分离、纯化获得 １４、３８和 ２２株内生真菌，并采用总抗氧化性能测定、ＤＰＰＨ自由基清除实验和滤纸片法对７４株内生真菌抗氧化活 性、抑菌活性进行了筛选。结果表明：从桂花中分离获得的内生真菌ＧＨ０５发酵液的乙酸乙酯萃取液具有 较强的抗氧化活性和抑菌活性，其中发酵原液的等量乙酸乙酯萃取液总抗氧化性能达 １２９０４ ｇＶｃ／ｍＬ， μ 对ＤＰＰＨ自由基清除率为９０３５％，５倍浓缩的乙酸乙酯萃取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢 杆菌、苏云金芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌的抑菌圈直径分别可达 １３３、１９３、１２４、１４６和 １４４ ｍｍ。形态学和分子生物学鉴定结果表明ＧＨ０５为球毛壳菌。 关键词：内生真菌；桂花；抗氧化；抑菌；球毛壳菌 中图分类号：Ｒ２８５　　　 　　　　　　　　　　　　文献标志码：Ａ 内生菌是指一类在其部分或全部生活史中存 膏、精油、净油中的芳香物质［１９］。近年来，人们开始 活于健康植物组织内部，而不使宿主植物表现出 关注桂花叶和桂花果实中的活性成分，如桂花叶中 ［１］ ［２０］ 明显感染症状的微生物 。植物内生菌能产生多 的黄酮类 等。在生物活性方面，有关研究表明， ［２１］ ［２２］ 种活性物质，具备多种生物学活性，在生物制药、 桂花各种组织提取物具有抗氧化 、抑菌活性 农业生产及发酵工业等领域的应用前景非常广阔， 等，其生物活性与黄酮类化合物密切相关。已有众 成为各国竞相研究的热点［２－３］。其中，内生真菌 多研究成果表明植物内生菌与植物本身的次生代 由于在数量、种类上均优于内生细菌和放线菌而 谢产物密切相关［２３－２４］。尽管相关性机制尚未完全 尤受关注。迄今为止，抑菌和抗氧化活性物质是 明了，但可以肯定植物内生菌中的生理生化代谢与 植物内生真菌中研究最为深入的活性物质。徐利 宿主植物体内的生理生化代谢具有某种程度的一 ［４］ ［５］ 剑等 及马养民等 曾对植物内生真菌抗菌活性 致性或关联性，目前尚未见有桂花内生菌的相关研 ［６］ 物质的研究进行了综述，最近又从滇牡丹 、荞 究报道。笔者对桂花树内生真菌进行了分离并对 ［７］ ［８］ ［９］ 麦 、ＳａｐｉｎｄｕｓｓａｐｏｎａｒｉａＬ 、龙血树 、无花 其抗氧化、抑菌活性菌株进行筛选，以期为广西特 ［１０］ ［１１］ 果 、小麦 等植物内生真菌中发现具有抑菌活 色香料植物的深入开发利用提供新的思路。 ［１２］ ［１３］ 性物质，而从盐生海芦笋 、蒺藜 、粉背雷公 ［１４］ ［１５］ ［１６］ ［１７］ １　材料与仪器 藤 、葛根 、银杏 、木豆 及其他药用植 物［１８］中分离的内生真菌则可合成抗氧化活性物质。 １１　材料