BRM-SJS大鼠长期毒性试验.ppt

* BRM-SJS大鼠长期毒性试验 ? 摘要：本研究观察了BRM-SJS用药过程中对大鼠进食、生长、血象、肝肾功能生化指标，主要脏器系数和组织形态学影响。应用Wistar大鼠160只，采用三个剂量，连续灌胃给药90天，即1.0g/kg 20ml，2.0g/kg 20ml，4.0g/kg 20ml。在给药过程中和停药后30天定期检查上述有关指标。 结果证实：BRM-SJS对大鼠进食，血液学指标，血液生化指标均未见明显影响，对9种重要脏器，(心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺、睾丸或卵巢)的脏器指数无明显影响，肉眼观察未见病理改变，镜下观察亦无阳性发现。 ? 一、试验目的： 观察大鼠在长期服用BRM-SJS过程中，有无蓄积性或迟缓性毒副反应，以及出现的毒副反应在停药后的30天内是否能够恢复正常。 ? 二、材料与方法： 1.药物：BRM-SJS，北京临床肿瘤基因研究所提供。 2.动物：Wistar大鼠160只，50-60g，月龄1.5个月。雌雄各半，二级实验动物。购自中国医学科学院实验动物中心，合格证号医动字01-3008号。 本所实验动物室实验动物设施合格证号：京动管准字(1994)第103号。 动物实验设施合格证号，京动管准字(1996)第007号。 ? 3.?试验方法：大鼠购入后观察1周，未发现不健康大鼠。随机分为4组，每组40只，雌雄各20只，即(1)空白对照组：灌服与药液同体积的供动物饮用的蒸馏水20ml/kg；(2) RBM-SJS低剂量组：1.0g/kg；(3) RBM-SJS中剂量组：2.0g/kg；(4) BRM-SJS高剂量组：4.0g/kg。 给药容积2ml/100g体重。每天灌胃，连续180天。服药的三个月内每周称重并调整药量，平时观察动物服药后的反应，包括饮食、活动、毛发、神志、口鼻眼眦、二便及死亡情况。每月定期记录1次日进食量。 给药前，给药后30天，60天，90天和停药后30天，分别由尾静脉取血检查计数红细胞(RBC)，血色素(Hb)，白细胞(WBC)及分类，血小板(P)等指标。给药90天和停药后30天处死前，摘取眼球，取血测定血液学10项生化指标，包括谷草转氨酶(AST)，谷丙转氨酶(ALT)，碱性磷酸酶(ALP)，总蛋白(TP)，白蛋白(ALB)，总胆红素(T-BIL)，肌酐(Crea)，总胆固醇(T-CHOL)，尿素氮(BUN)和血糖(GLU)。每于尾静脉采血日，同时作尿常规检查。 血象检查用日本东亚F820全自动血象分析仪，血液生化指标检测用Olympus AU600生化检测仪进行，病理切片采用Olympus BH-20光学显微镜阅片。 给药结束后24h处死中、低剂量组全部大鼠，对照组、高剂量组处死半数动物(雌雄各20只)，停药后30天，再处死两组剩余的半数动物，作恢复期观察。 凡处死后的大鼠，立即进行尸体解剖，目视主要脏器的外观是否有病理改变，留取并称重心、肝、脾、肺、肾、胰、肾上腺、睾丸或卵巢，用以计算脏器指数(g/100g体重)，留取全部或部分组织器官用10%福尔马林液固定，常规程序切片，HE染色后进行组织形态学镜检。 ? 三、试验结果 1.?动物一般状况：4组动物试验期间饮食正常，活动自如，口鼻眼雌无分泌物，毛发光泽不紊乱。试验期内，动物无死亡。表1显示BRM-SJS对大鼠进食量的影响，数据显示，大鼠的组间进食量无明显差异。 2. BRM-SJS对大鼠体重的影响，结果见表二。停药后次日称重，高剂量雄性大鼠体重为290.8?18.5克，稍低于对照组相应的330.3?23.3(P0.05)，停药后30天恢复期内，该组大鼠体重已升至356.5?18.8克，与对照组雄性鼠比较(361.8?21.6克)已无明显差异(P0.05)。其余各组动物同期比较体重增长基本一致。 3.? BRM-SJS对大鼠血象的影响： 白细胞：给药前后各组大鼠同期比较。外周白细胞计数无明显差异，波动于正常值水平。见表3。 白细胞分类：表4说明试验期间大鼠外周白细胞分类的组间同期比较，W-SCC 和 W-LCC 均在正常值范围，无明显差异。 红细胞和血色素：表5、表6为大鼠外周血红细胞和血色素检测结果，同期组间比较无差异，均在正常值范围。 血小板计数：亦显示5次查血各组数值都在正常值水平。组间同期比较或组内不同期比较，均无明显差异(表7)。