骨型碱性磷酸酶在临床检测中的发展研究.docVIP

精品论文 参考文献 骨型碱性磷酸酶在临床检测中的发展研究 杨涛1 钟晓华2 应军1 （1四川三台县人民医院检验科 四川三台 621100；2四川三台县中医院检验科 四川三台 621100） 【中图分类号】R336 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）28-0214-02 【摘要】 骨型碱性磷酸酶(BALP）在人体的生理功用主要是在成骨过程中水解磷酸酯，为羟磷灰石的沉积提供必需的磷酸，同时水解焦磷酸盐，解除它对骨盐形成的抑制作用，有利于成骨过程。其与临床多种疾病有着密切的联系，尤其可作为骨代谢异常的标志物，故对其进行检测有着越来越重要的临床价值。 【关键词】骨型碱性磷酸酶 骨代谢 碱性磷酸酶（ALP）几乎存在于人体的各种组织，系膜结合酶，肠上皮、肾小管、成骨细胞、肝脏、胎盘及白细胞中尤其丰富。血清中ALP主要来源于肝和骨。ALP由一组同工酶组成，根据聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率，依次命名为ALPⅠ～Ⅶ[1] 。在机体的生理功用主要是在成骨过程中水解磷酸酯，为羟磷灰石的沉积提供必须的磷酸；同时，水解焦磷酸盐，解除其对骨盐形成的抑制作用，有利于成骨过程。BALP与临床多种疾病有着密切的联系，尤其可作为骨代谢异常的标志物。故对BALP的理化性质、分子生物、作用机制等进行深入研究以及准确的定量测定将有助于其在临床上的应用。本文拟就近年来国际国内上BALP的临床应用以及常用的检测方法作一综述。 1 BALP的临床应用 1.1 BALP与骨质疏松症 临床研究表明，血清BALP活力的定量测定可作为监测骨形成变化的有效参数。骨密度的改变太慢以致不能作为临床监测治疗效果的早期反应。作为成骨细胞的一种成分，BALP参与成骨过程并且其活性在血清中稳定没有昼夜变化，因此血清BALP活力的定量测定可作为观察骨形成变化率，为临床提供有效治疗的监测手段。 1.2 BALP与佝偻病 BALP由成骨细胞合成。当成骨细胞转化为骨细胞时，活性下降并消失，如骨钙化一旦不足，成骨细胞不能钙化，失去活性，使成骨细胞代偿性增加，BALP相应增多，血浆中BALP的活性增高，这时血清中BALP的活性可较准确的反应骨改变的情况，血清中钙磷受体内多种激素调节，佝偻病早期血清中钙磷可正常，X线对典型病例有诊断价值，但对早期病例不易识别，诊断可靠性差。血清钙、磷和ALP只能反映人体近期维生素D3的营养水平，不能反映人体长期钙营养状况，且检出率低，故BALP的测定应称为早期诊断的特异性指标。 同时对于使用钙剂和维生素D的患儿具有明确的疗效判定指标，能避免上述药物的滥用，减少医源性损害发生，指导临床合理用药。故陈玉霞[2]等认为BALP对佝偻病诊断具有敏感度高，特异性强，方便快捷的优点，结合佝偻病诊断标准，有利于早发现，早诊断，同时治疗时，有目的有指标，可避免钙及维生素中毒，值得临床推广。 1.3 BALP与多发性骨髓瘤 多发性骨髓瘤患者由于骨再造不平衡，血中的BALP活性明显低于正常人。 1.4 BALP与生长激素缺乏的儿童 生长激素缺乏的儿童，使用生长激素后生长速率加速，血清BALP活性增加，并且与生长激素治疗所诱导的高SD分数正相关，能有效地监测对生长激素治疗的反应性。 1.5 BALP与其他疾病 在其他的骨代谢异常疾病，血清中的BALP活性均有不同程度的增高，而且增高的程度大于ALP总活性的增高程度。对BALP活性的检测以及动态观察将为骨代谢异常疾病的早期诊断、治疗效果的监测、病情预后等提供有效的依据。 2 BALP的检测 2.1电泳法 电泳法主要利不同的同工酶之间物理性状、分子大小及荷电量的不同而进行。根据所用的支持特和操作的方法可分为：醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和亲和电泳等。其中以等电聚焦电泳和亲和电泳的分辨效果较好。等电聚焦电泳分辨率高特别适合次级同工酶的分离。 2.2 非电泳法 2.2.1化学抑制法、热失活试验 化学抑制法、热失活试验灵敏度和特异性较差，只能用作鉴别某些病理血清BALP组织来源的过筛试验。 2.2.2亲和沉淀法 亲和沉淀法和亲和电泳法一样利用麦胚植物血凝素的作用将BALP和其他组织来源的ALP分开，然后测定BALP的活性。该方法操作简便，有较好的灵敏度和特异性，但是当血清标本含有胆汁型ALP时，由于该酶也能和麦胚植物血凝素结合而使BALP假性增高。 2.2.3干化学法 干化学法测定BALP操作步骤多，不适合大批量标本的检测。 2.2.4热灭活