不同浓度6-BA、GA3对农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化率的影响.doc

各专业完整优秀毕业论文设计图纸 学号： 哈尔滨师范大学 学士学位论文 题 目 不同浓度6-BA、GA3对农杆菌介导的大 豆子叶节遗传转化率的影响 学 生 指导教师 年 级 2009级 专 业 生物技术（生物制药） 系 别 生物工程与技术系 学 院 生命科学与技术学院 哈 尔 滨 师 范 大 学 学士学位论文开题报告 论文题目 不同浓度6-BA、GA3对农杆菌介导的大豆 子叶节遗传转化率的影响 学生姓名 指导教师 李新玲 副教授 年 级 2009级 专 业 生物技术（生物制药） 2012年 8月 说 明 本表需在指导教师和有关领导审查批准的情况下，要求学生认真填写。 说明课题的来源（自拟题目或指导教师承担的科研任务）、课题研究的目的和意义、课题在国内外研究现状和发展趋势。 若课题因故变动时，应向指导教师提出申请，提交题目变动论证报告。 课题来源： 自拟题目 课题研究的目的和意义： 大豆是我国重要的油料作物之一，是人民生活中的植物蛋白和油份的重要来源，也是主要的工业原料。大豆是目前公认的较难进行遗传转化的植物，主要是因为大豆的再生率较低，高效大豆再生体系的建立是大豆遗传转化的基础。虽然我国已克隆具有自主知识产权的抗除草剂基因，但大豆的遗传转化减缓了利用遗传转化方法进行大豆品种改良的速度。 国内外同类课题研究现状及发展趋势： 大豆转基因研究始于1984年，自1988年Hinchee等用农杆菌侵染大豆子叶节获得转基因大豆植株以来，大豆的遗传转化研究受到广泛的重视，农杆菌介导法也成为大豆分子育种和基因功能研究的重要手段。1988年Meurer等报道了农杆菌转化大豆子叶节的影响因素，发现用超声处理过的子叶节较对照容易转化。1999年Zhang等以Bar 基因作为筛选标记基因，农杆菌法转化大豆子叶节频率达3%。2003年Olhoft等相继报道了在培养基中添加硫醇类化合物和L-半胱氨酸可以防止由农杆菌侵染导致的组织坏死现象，从而提高转化频率。2006年Paz等以无菌水浸泡16h的子叶节为外植体进行转化，遗传转化效率达到了1.4%～7.8%。2010年Yamada 等通过用微型金属毛刷对子叶节外植体造成机械损伤以及在侵染液中加入0.02%的SilwetL-77使遗传转化效率从1.0%提高到4.4%。 目前，大豆再生所用的外植体主要有子叶节，无菌苗的茎尖，未成熟胚子叶，上胚轴和初生叶，子叶，成熟胚的胚尖等。大豆子叶节是遗传转化中应用最普遍的外植体，是大豆遗传转化应用最广泛的方法。2007年李文霞等以大豆品种黑农35的子叶节为材料，研究6-BA对子叶节再生三个阶段即无菌苗萌发、丛生芽诱导、丛生芽伸长的影响。2010年杜升伟等研究优化了包括种子消毒方法、生长调节剂用量和抗生素种类在内的影响农杆菌介导大豆子叶节遗传转化效率的多个因素。2011年孙明杰等研究了大豆子叶节高频愈伤组织诱导及其植株再生，以萌发以萌发7d的大豆子叶节切断及其切片为外植体，研究了萌发培养基、不同激素及其配比对大豆子叶节愈伤组织诱导与分化的影响。2011年武小霞等对大豆子叶节再生中植物生长调节剂浓度及基因型筛选进行了研究，以黑农35为实验材料，对大豆子叶节再生过程中种子的灭菌方法、萌发培养基中植物生长调节剂的浓度、丛生芽分化、生根培养与驯化等过程中植物生长调节剂的浓度进行了研究。 课题研究的主要内容和方法，研究过程中的主要问题和解决办法： 课题研究的主要内容：课题研究的方法研究过程中的主要问题：解决办法：向老师请教利用网络资源进行查询 课题研究起止时间和进度安排： 2012年7月—2012年8月：查阅相关资料，确定实验方案；研究不同激素水平对大豆遗传转化效率的影响。 2012年9月—2012年12月：观察大豆生长情况，整理统计实验数据，补充实验内容，完善实验结果。 2013年1月—2013年3月：整理实验数据，撰写论文。 2013年4月—2013年5月：修改论文并最终定稿。 课题研究所需主要设备、仪器及药品： 所需设备及仪器： 通风橱、超净工作台、高压灭菌锅、离心机及PCR仪、酸度PH计等。 药品：B5培养基、酒精及各类激素等。 外出调研主要单位，访问学者姓名： 无 指导教师审查意见： 论文立题新颖，资料丰富，论证充分，有较强的实际应用价值，可以开题。 指导教师 （签字） 　2012年 8 月 教研室（研究室）评审意见： 同意开题。 __遗传学_教研室（研