高效液相色谱法测定断血流胶囊中断血流皂苷A的含量.docVIP

精品论文 参考文献 高效液相色谱法测定断血流胶囊中断血流皂苷A的含量 刘立辉 (吉林省辉南县人民医院药剂科辉南135100) 作者简介：刘立辉(1972.8-),本科,本文研究方向：中成药有效成份含量测定。 【摘要】断血流胶囊是由断血流干浸膏制成。具有凉血止血的功能，用于功能性子宫出血，月经过多，产后出血，子宫肌瘤出血，尿血，便血，吐血，咯血，鼻衄，单纯性紫癜，原发性血小板减少性紫癜等。原标准中含量测定为薄层扫描法，为更好地控制该制剂的内在质量，故将原含量测定方法薄层扫描改为高效液相色谱法，该法重现性好，结果准确。 【关键词】断血流胶囊;高效液相色谱法;断血流皂苷A 【中图分类号】R286.0【文献标识码】B【文章编号】1008-6455（2010）10-0190-01 1方法 （1）仪器与试药:岛津LC－6A高效液相色谱仪；断血流皂苷A对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号110782－200301）；甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。 （2）色谱条件:甲醇-水（75:25）为流动相；检测波长250nm，理论板数按断血流皂苷A计算，应不低于3000。色谱柱：Diamonsil C18 (Phi;4.6times;250mm) ODS（5um）。 （3）对照品溶液的制备:同正文。 （4）供试品溶液的制备:同正文。 2方法学考察 （1）系统适用性试验，按正文方法测定，得到断血流皂苷A对照品及样品的色谱图 计算断血流皂苷A峰的理论板数 n=5.54times;(tRWn/2)2=5.54times;(10.0980.298)2=6361 在此条件下，断血流皂苷A与其相邻的峰分离完全，分离度符合规定。参照有关资料确定理论板数以断血流皂苷A计算不得低于3000。 （2）测定波长的选择 经测定断血流皂苷A对照品甲醇溶液的紫外吸收光谱的最大吸收波长为250nm，故选取定250 nm为测定波长。 （3）流动相的选择 试验比较了（A）甲醇-水（75∶25）和（B）乙腈-0.05%磷酸溶液（16∶84）两种流动相，结果表明，流动相（A）可获得更好的分离，且保留时间较短，柱效高。故选择了甲醇-水（75∶25）为流动相。 （4）提取方法的考察 试验比较了（A）正文方法；（B）甲醇超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶液，上D－101大孔吸附树脂柱，水洗50ml，氨试液2ml洗柱，水洗至中性，再用50%乙醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，定容于25ml。结果方法（A）和（B）测得的含量基本一致，但方法（A）较（B）更直接简单。故选定方法（A）为本法的测定方法。 （5）标准曲线的制备 分别精密称取断血流皂苷A对照品适量，加甲醇制成每1ml含30mu;g的溶液，分别精密吸取1、2、4、6、10?l，注入液相色谱仪，测定，以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，结果见表1。 表1线性关系考察 . 结果表明，断血流皂苷A在0.03～0.30mu;g的范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系。 （6）稳定性试验 取本品0.2g（批号040501），按正文收载的含量测定方法测定，结果见表2。 表2稳定性试验结果 . 如表2所示，在16小时内，供试品溶液中断血流皂苷A的含量基本稳定。 （7）精密度试验 精密吸取上述供试品溶液10mu;l（批号040501），注入液相色谱仪，重复5次，按色谱峰面积值计，结果见表3。 表3精密度试验结果 . 结果表明：其峰面积基本一致，所用仪器精密性良好。 （8）重现性试验 取同一供试品（批号040501），依正文方法独立测定五次，结果见表4?? 表4重现性试验结果 . 结果表明：该方法重现性很好。 （9）回收率试验 精密称取同法测定已知含量的供试品（批号040501）（含量：1.714mg/粒）五份，精密加入断血流皂苷A对照品甲醇溶液（30?g/ml）60ml，依法测定，计算回收率，结果见表5。 表5回收率试验结果 . 如表5所示，本法平均回收率99.98％，RSD为1.48％，表明本法回收率较好，准确度较高。 3样品测定结果及限度 取3批样品按正文方法条件测定，结果见表6。 表6样品含量测定结果 . 如表6所示，三批样品