黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响.docVIP

精品论文 参考文献 黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响 朱永俸1 石高星1 吴剑平1 李珊珊1 袁婧1 黄立师1 刘佳2(通讯作者) 　　（1长沙医学院2010级生物技术专业 湖南长沙 410219） 　　（2长沙医学院生物学教研室 湖南长沙 410219） 　　【摘要】目的 探讨黄芪多糖对小鼠的免疫功能的影响。方法 连续28天黄芪多糖以4.0，1.0，0.25g／kg浓度给予小鼠灌胃,检测小鼠的胸腺，脾脏指数及小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。结果　低浓度组的胸腺指数高于空白组（P=0.017），中浓度组的脾脏指数高于空白组（P=0.002），其他各组差别无统计学意义。各组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、吞噬指数无显著差别（F=2.088，P=0.140）。结论　黄芪多糖可能通过提高胸腺和脾脏的功能从而增强免疫力，但对参与非特异免疫的巨噬细胞影响不明显。 　　【关键词】 胸腺 脾脏指数 吞噬能力 　　【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）31-0254-02 　　长期以来，人类生活在一个充满危险的环境，得以存续的同时，也获得了非凡的免疫力。免疫力低下的机体易于感染、易于生病；如引发过敏反应、自身免疫病等，因此优化免疫力已经成为了医学研究的热点之一。中药黄芪的使用迄今已有2000多年的历史，有利尿、抗疲劳、抗衰老、抗应激、降压等多方面作用，关于黄芪是否能够增强机体免疫能力尚需研究。黄芪的主要活性成分是黄芪多糖，因此，本实验通过给小鼠连续灌胃黄芪多糖，研究黄芪多糖对小鼠免疫力是否具有提升作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 主要试剂和仪器 　　黄芪多糖(纯度70%，批号；电子恒温不锈钢水浴锅（上海市南阳仪器有限公司）；光学显微镜（MOTIC公司）；1%鸡红细胞悬液 ；6%淀粉肉汤(含0.3%台盼蓝)）；吉姆萨染液；其他试剂为分析纯。 　　1.1.2 动物 　　40只SPF级昆明小鼠，雄性，体重(22plusmn;2)g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，批号43004700000750，长沙医学院湖南省重点建设学科标准动物室饲养。 　　1.2 方法 　　1.2.1 动物处置 　　实验以4.0，1.0，0.25g／kg浓度设3个剂量组，另???1个对照组，每组10只小鼠，采用灌胃法，对照组给予等量蒸馏水，每天一次，连灌28天，第27、28天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤1ml。第29天，称重后腹腔注射20%鸡红细胞悬液0.5-1ml,轻柔小鼠腹部。30min后,再向腹部内注射0.5ml小鼠生理盐水,轻柔小鼠腹部。3min后，将小鼠以颈部脱位法处死。小鼠剪开腹腔，用不装针头的注射器吸取腹腔液涂片，吉姆萨染色后，检测巨噬细胞吞噬能力。分离脾脏和胸腺，洗净吸干水分，称重。 　　1.2.2 胸腺和脾脏指数的测定 　　摘取小鼠的胸腺和脾脏，用滤纸吸干残血后，称重（mg），按公式计算胸腺指数和脾脏指数，即：胸腺指数=胸腺重量/（小鼠体重times;10） 　　脾脏指数=脾脏重量/（小鼠体重times;10）（每10 g小鼠体重含有的胸腺或脾mg重量，mg/10 g） 　　1.2.3 巨噬细胞吞噬能力的测定 　　剪开腹部皮肤，将注射器伸入小鼠腹腔中，吸取腹腔液，把腹腔液滴加在洁净的载玻片上，然后将载玻片置于电子恒温不锈钢水浴锅中，在37℃恒温孵育30分钟。将载玻片取出，用水轻轻的冲洗，去除上清和未粘附在玻片上的细胞在室温下晾干。再用甲醛固定3分钟，晾干后用吉姆萨染色，冲洗多余的染液晾干。在油镜下观察计数100个巨噬细胞，计算出吞噬百分率（吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞所占比率）和吞噬指数（每100个巨噬细胞中吞噬了红细胞个数)。 　　1.2.4 统计学方法 　　采用SPSS 19软件进行数据分析处理，数据以`xplusmn;s表示。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较方法采用LSD法，Plt;0.05有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1黄芪多糖对胸腺指数，脾脏指数的影响 　　经过28天不同浓度的黄芪多糖灌胃，各组的胸腺指数存在区别（F=3.588，P=0.036），其中低浓度组的胸腺指数高于空白组（P=0.017），其他各组差别无统计学意义。各组的脾脏指数存在区别（F=4.914，P=0.012），其中中浓度组的胸腺指数高于空白组（P=0.002）。 　　表1 黄芪多糖对小鼠胸腺指数与脾脏指数的影响（x-plusmn;s，n=10） 　　 　　3 讨论 　　本实验主要研究黄芪多糖（APS)对小鼠免疫器官（包括脾脏，