转基因工具上课用.ppt

DNA分子双螺旋结构模型 DNA分子是有 条链组成， 盘旋成 结构。 交替连接，排列在外侧，构成基本骨架； 排列在内侧。 碱基通过 连接成碱基对，并遵循 原则。 综上所述，基因工程的主题：是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，因此又叫做DNA重组技术。 阅读课本第2-3页“科技探索之路”—基础技术和理论的发展催生了基因工程！ 1、不同生物的DNA能够重组的理论基础？ 2、外源基因能在受体细胞内表达的理论基础？ DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性内切酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） ——基因进入受体细胞的载体 限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程 限制酶所识别的序列，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 图1-1 限制酶识别序列的中心轴线 §1.1 DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶----“分子手术刀”： (1)来源： （2）特点： （3）切割后的形式：2种 分别为：黏性末端和平末端 注：限制性酶是一大类酶，不是一种酶。 限制酶大多可以专一性识别双链DNA分子上的某种特定核苷酸序列，限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称，重复排列的。 三、基因进入受体细胞的载体 1.作用 2.条件 3.种类 DNA连接酶 DNA聚合酶 相同点 作用实质 化学本质 不 同 点 模板 作用对象 作用结果 用途 都能催化形成磷酸二酯键 都是蛋白质 不需要 需要 形成完整的重组DNA分子 形成DNA的一条链 基因工程 DNA复制 DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 只能将单个核苷酸连接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯键 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 * DNA的基本组成单位是：脱氧核苷酸 脱氧核苷酸 = 脱氧核糖 + 磷酸 + 含氮碱基 含氮碱基包括：A、T、G、C（四种碱基） 磷酸 脱 氧 核 糖 碱基 A T G C A T C G 鸟嘌呤脱氧核苷酸 胞嘧啶脱氧核苷酸 胸腺嘧啶脱氧核苷酸 腺嘌呤脱氧核苷酸 A G C T 脱氧核苷酸分子的连接： A G C T 磷酸二酯键 脱氧核糖连接磷酸 T C G A A G C T A T T A G C 反向平行 双螺旋 脱氧核糖和磷酸 碱基 氢键 碱基互补配对 2 基因与DNA的关系？ 基因是有遗传效应的DNA片段， 是生物体遗传的功能单位和结构单位。 转录 DNA RNA 翻译 蛋白质 逆转录 中心法则和中心法则的发展 复制 复制 原理 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 生物体外 基因 DNA分子水平 定向改造生物的遗传性状，获得人类需要的生物类型和生物产品 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 DNA重组技术或基因拼接技术 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 重组DNA 导入 形成 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 形成重组DNA 关键步骤三： 重组DNA导入受体(棉花)细胞 来源 种类 作用 作用结果 自主学习 原核生物 已经分离出大约4000种 1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列 2、使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 形成两种末端：黏性末端或平末端 G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 3’端 5’端 3’端 5’端 磷酸二酯键 大肠杆菌的一种ＥcoRI 限制酶能识别 序列，并在 之间切开。 限制酶 GAATTC G和A 一.限制性核酸内切酶----“分子手术刀”： 点击播放 限制酶 什么叫黏性