医学论文-大鼠孤束核内H3 受体对哮喘发作时脑组织中Fos蛋白表达的影响.docVIP

医学论文-大鼠孤束核内H3 受体对哮喘发作时脑组织中Fos蛋白表达的影响 ??????????????? 作者：胡春梅，董榕，刘保森，张晓红，季吉 【关键词】? 哮喘???? 　　Abstract:Objective To investigate the expression and distribution of the estrogen receptors（ER）in the lung of male rats.Methods The expressions of ER.αmRNA and ER.βmRNA in lung tissues was detected by reverse transcription-poly-merase chain reaction（RT-PCR），and ER.βprotein in lung was detected by immunohistochemistry.Results Aside from weak expression of ER.αmRNA，lung tissue showed moderate expression of ER.βmRNA.The positive ER.βimmunoreac-tivity was presented in columnar epithelium，intermediate cells，basal cells，smooth muscle cells of lung tissue and in pulmo-nary vascular smooth muscle cells，endothelial cells.Conclusion ER.βis distributed in lung tissue of male rats.?? 　　Key words:estrogen receptor;lung tissue;immunohistochemistry;rats ???? ［摘要］目的: 探讨大鼠孤束核（NTS）内组胺H3 受体对哮喘发作时大脑Fos蛋白表达的影响及其意义。 方法: 取健康雄性SD大鼠制备哮喘模型并诱发哮喘发作，采用中枢立体定位及微量注射技术，分3组分别在NTS内微量注射无菌生理盐水、H3 受体激动剂R.α.methylhistamine（RMHA）以及H3 受体拮抗剂thioperamide（Thio）加RMHA，用SABC免疫组织化学方法测定大鼠哮喘急性发作后1hFos蛋白在丘脑至延髓平面各核团的分布情况。 结果: 与哮喘组相比，哮喘大鼠NTS内微量注射1μgRMHA，丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核、NTS等核团Fos蛋白表达减少，阳性细胞数降低，差异有显著性（P0.01）;而用Thio5μg预处理则可拮抗RMHA的上述效应。 结论: NTS内H3 受体可能通过丘脑室旁核、下丘脑室旁核和室周核等脑区相关神经元参与对哮喘的神经调控，从而可能抑制哮喘发作。???? 　　［关键词］ 大鼠;孤束核;H3 受体;哮喘;Fos蛋白;表达 　　支气管哮喘是一种常见的气道慢性变态反应性炎症，发病机制非常复杂，其中涉及多种炎性细胞和炎性介质，目前已证实c-fos参与了气道炎症反应。c-fos是一种即刻早期基因，在生理状态下即有低水平表达，调控着多种细胞的生长和分化，参与重要脑功能活动的信号转导和调控过程，已被公认为脑功能活动形态学定位标记物之一［1］ 。本研究拟在大鼠孤束核（nucleus tractus solitarius，NTS）内微量注射H3 受体激动剂（R.α.methylhistamine，RMHA），用Fos蛋白抗体免疫组织化学方法检测丘脑至延髓平面各核团Fos蛋白的表达情况，初步探讨NTS内H3 受体可能通过哪些脑区神经元来调控大鼠哮喘发作时的呼吸运动，从而为揭示哮喘发病机制和开发有效的抗哮喘药物提供实验依据。 　　1 材料和方法 　　1.1 哮喘模型制备???? 　　雄性成年SD大鼠28只，体重250～300g，由东南大学医学院实验动物中心提供，在安静、温暖（18～25℃）、避强光、明暗周期为10.14h的实验室预饲养1周后，随机取24只大鼠分成哮喘模型组（n=18）和生理盐水（NS）对照组（NS组，n=6）。实验第1天，每只模型组大鼠腹腔注射用卵蛋白（OVA）粉末100mg、氢氧化铝干粉100mg、灭活的百日咳杆菌5×109 个配成的混悬液1ml1次，自第15天开始用超声雾化器给大鼠雾化吸入1%OVA NS溶液（2～3ml?min-1 ，颗粒直径≤5μm），每天1次，每次均以哮喘症状出现（烦躁不安、呼吸急促、用力呼吸、呼吸困难、喘息、腹肌明显收缩、咳嗽等）作为指标，连续3d。NS组大鼠在致敏和吸