注射剂用中药材指纹图谱研究PPT.ppt

特征区 种内指纹区 白鲜皮根皮与木心部分指纹图谱比较 根皮 木心 3、不同药用部位指纹图谱的区别 红花药材的指纹图谱研究 红花商品药材指纹 1 2 3 4 5 6 红花商品药材指纹图谱 红花商品药材指纹图谱 新疆产红花指纹图谱 第二部分中药注射剂及其有效部位或中间体指纹图谱的检测标准 8个厂家注射液皂苷成分 不同企业生产注射液指纹图谱比较(ELSD检测) 8个厂家注射液黄酮类成分 不同企业生产注射液指纹图谱比较(紫外检测) 定义： 中药注射剂指纹图谱系指中药注射剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该注射剂特性的共有峰的图谱。 要求：以有效部位或中间体投料的中药注射剂，还需制定有效部位或中间体的指纹图谱。 一、指纹图谱的检测标准 内容： 供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数。 1、供试品的制备 要求：根据注射剂、有效部位或中间体中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。 注意：制备方法必须确保该注射剂、有效部位或中间体主要化学成分在指纹图谱中的再现。 2、参照物的制备 制定指纹图谱必须设立参照物，应根据供试品中所含化学成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物； 如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。 参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法。 3. 测定方法 包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。 应根据注射剂、有效部位和中间体所含化学成分的理化性质，选择适宜的检测方法。建议优先考虑色谱方法。 对于成分复杂的注射剂、有效部位和中间体，特别是复方中药注射剂，必要时可以考虑采用多种检测方法，建立多张指纹图谱。 制定指纹图谱所采用的色谱柱、薄层板、试剂、测定条件等必须固定，采用光谱方法制定指纹图谱，相应的测定条件也必须固定。 4.指纹图谱及技术参数 (1)指纹图谱 根据供试品指纹图谱的检测结果，建立指纹图谱。 采用HPLC和GC制定指纹图谱，根据样品中所含成分的情况确定记录时间；采用薄层扫描法制定指纹图谱，必须提供从原点至溶剂前沿的图谱；采用光谱法制定指纹图谱，必须按各种光谱的相应规定提供全谱。 对于化学成分类型复杂的中药注射剂、有效部位和中间体，特别是中药复方注射剂，必要时建立多张指纹图谱。 2.共有指纹峰的标定 根据10批次以上供试品的检测结果，标定共有指纹峰。 色谱法采用相对保留时间标定指纹峰，光谱法采用波长或波数标定指纹峰。 色谱峰的相对保留时间根据参照物的保留时间计算。 黄芪甲苷 芒柄花素 毛蕊异黄酮苷 芒柄花素苷 毛蕊异黄酮 黄芪药材蒸发光散射检测器检测指纹图谱 黄芪药材紫外检测器(280nm)检测指纹图谱 7个省皂苷成分 甘肃 黑龙江 陕西 其他 河北 山西 内蒙古 辽宁 不同产地黄芪蒸发光散射检测器检测指纹图谱比较 7个省黄酮类成分 陕西 山西 甘肃 黑龙江 内蒙古 河北 其他 辽宁 不同产地黄芪药材紫外检测器检测指纹图谱比较 4、8个省50种药材样品指纹图谱考察 8个省50种药材样品的紫外检测考察结果条形图（毛蕊异黄酮苷峰面积） 8个省50种药材中性成分的考察图谱（黄芪甲苷峰面积） 3、供试品的制备 说明选用制备方法的依据。 供试品需要提取、纯化，应考察提取溶剂、提取方法、纯化方法等，提取、纯化方法应力求最大限度地保留供试品中的化学成分。 供试品需要粉碎检测，应考察粉碎方法、粒度等。 4、参照物的制备 参照物的选择及其依据。根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品或内标物作为参照物。 试验样品制备的依据。根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备，说明制备理由。 5、检测方法 检测方法的选择 检测方法的原理 色谱条件与系统适用性试验：包括色谱柱、流动相、检测波长、流速、柱温等考察 方法学考察资料和相关图谱（包括稳定性、精密度和重现性） 对于所含成分类型较多的中药材，如一种检测方法或一张图不能反映该中药材的固有特性，可以考虑采用多种检测方法或一种检测方法的多种测定条件，建立多张指纹图谱。 Lichrosorb 250*4.6mm 10μm （大连依利特公司 Diamasil 200*4.6mm 5μm （迪马公司） Lichrospher 250*4mm 5μm (默克公司) 1、色谱柱考察 肉苁蓉药材指纹图谱研究的色谱柱的考察： 甲醇－水系统 乙腈－水系统 0.095%磷酸乙腈- 0.095%磷酸系统 2、流动相考察 肉苁蓉药材指纹图谱研究的流动相的考察： 3、检测波长考察 肉苁蓉药材指纹图谱研究的检测波长的选择： 稳定性试验 主要考察供试品的稳定性。 取同一供试品，分别在不同时间检测，考察色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性，确定检测时间。 采用相似度软件进行评价，要求相似度大于0.9