拟南芥 AAP1基因的克隆及植物表达载体的构建 Cloning and Plant Expression Vector Construction of AtAAP1 Gene from Arabidopsis thaliana.pdfVIP

吉林农业大学学报　 ２０１４，３６（５）：５６４～５６９ ｈｔｔｐ：／ ／ ｘｕｅｂａｏ．ｊｌａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｌｎｄｘｂ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ 拟南芥 ＡＡＰ１基因的克隆及植物表达载体的 构建∗ １∗∗ １ １ １ １ ２ 崔喜艳 ，佟珊珊 ，范　 贝 ，王　 阔 ，胡广宇 ，刘相国 １． 吉林农业大学生命科学学院，长春 １３０１１８；２． 吉林省农业科学院农业生物技术研究所， 长春 １３００３３ 摘　 要：拟南芥氨基酸透性酶１（ＡＡＰ１，也叫ＮＡＴ１）是植物中第一个被分离的氨基酸转运蛋白，在拟南芥主 － 根、侧根、根毛及根表皮细胞中均有增加氨基酸含量的作用。 本研究利用ＲＴ ＰＣＲ 的方法，从拟南芥中克隆 了该基因，测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ（ＮＭ １０４６１６４）中已发表的拟南芥 ＡＡＰ１（ＡｔＡＡＰ１）基因的同源性高达 － ９９９３％；并将ＡｔＡＡＰ１基因与ｐＣＡＭＢＩＡ３３００构建ｐ３３００⁃ＡＡＰ１植物表达载体，为过表达ＡｔＡＡＰ１基因，提高作 物氨基酸含量，从而改善作物氮素利用效率提供参考。 关键词：拟南芥；氨基酸透性酶１（ＡＡＰ１）；克隆；植物表达载体 中图分类号：Ｑ７８５　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃５６８４（２０１４）０５⁃０５６４⁃０６ ＤＯＩ：１０．１３３２７／ ｊ．ｊｊｌａｕ．２０１４．１８８６ 引文格式：崔喜艳，佟珊珊，范贝，等．拟南芥ＡＡＰ１基因的克隆及植物表达载体的构建［Ｊ］．吉林农业大学学 报，２０１４，３６（５）：５６４⁃５６９． Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＡｔＡＡＰ１ Ｇｅｎｅ ｆｒｏｍＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ １ １ １ １ １ ２ ＣＵＩＸｉ⁃ｙａｎ ，ＴＯＮＧ Ｓｈａｎ⁃ｓｈａｎ ，ＦＡＮ Ｂｅｉ ，ＷＡＮＧ Ｋｕｏ ，ＨＵＧｕａｎｇ⁃ｙｕ ，ＬＩＵＸｉａｎｇ⁃ｇｕｏ １． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３０１１８，Ｃｈｉｎａ；２． Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＪｉｌｉｎＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００３３，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｐｅｒｍｅａｓｅ １ （ＡＡＰ１，ａｌｓｏ ｃａｌｌｅｄ ＮＡＴ１） ｉｓ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａ⁃ ｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ，ａｎｄ ＡＡＰ１ｇｅｎｅ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ｔｏ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ ｉｎ ｍａｉｎ ｒｏｏｔｓ，ｌａｔｅｒａｌ ｒｏｏｔｓ，ｒｏｏｔ ｈａｉｒｓ ａｎｄ ｒｏｏｔ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌｓ． Ｉｎ ｔｈｉｓ － ｓｔｕｄｙ，ＡｔＡＡＰ１ｇｅｎｅｗａｓｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａｂｙ ＲＴ ＰＣＲ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｈｏｍｏｌｏｇｙ ａ