板栗实腐病菌rDNA-ITS 的RFLP和测序分析 RFLP and sequence analysis of rDNA-ITS in Castanea mollissima seed rot pathogens.pdfVIP

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2018-01-30 发布于上海
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板栗实腐病菌rDNA-ITS 的RFLP和测序分析 RFLP and sequence analysis of rDNA-ITS in Castanea mollissima seed rot pathogens

第32 卷第2 期经济林研究 Vol. 32 No.2 2014 年6 月 Nonwood Forest Research Jun. 2014 板栗实腐病菌rDNA-ITS 的RFLP和测序分析 a,b a,b a,b a,b a,b a,b a,b 傅本重，王立华，李国元，徐东生，王有宁，章爱群，邹礼平（湖北工程学院 a. 特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室；b. 生命科学技术学院，湖北孝感 432000 ）摘要：为了明确孝感本地板栗实腐病菌的种类及其多样性，对分离自孝感的11 株板栗实腐病菌的ITS 进行了测序和RFLP 分析。用通用引物ITS4 和ITS5 扩增病原菌的ITS1-5.8S-ITS2 区域，PCR 扩增产物经EcoR Ⅰ、 Hae Ⅲ和Taq Ⅰ分别酶切，酶切结果用软件NTSYSpc2.1 作聚类图。经ITS-RFLP 分析得到了11 条多态性DNA 条带，在遗传相似系数0.72 水平分为4 个类群。并对PCR 产物进行测序和BLAST 分析，相似序列用MEGA5.1 Botryosphaeria 无性态构建系统发育树。经形态学和ITS 双向测序和比对分析，病原菌主要来源于3 个属：（ Diplodia Neofusicoccum Fusarium Gibberella Neofusicoccum ）、和（有性态），其中为引起板栗实腐病菌的新报道属。关键词：板栗；实腐病；rDNA-ITS ；RFLP 中图分类号：S664.2 文献标志码：A 文章编号：1003—8981(2014)02—0009—05 RFLP and sequence analysis of rDNA-ITS in Castanea mollissima seed rot pathogens FU Ben-zhonga,b, WANG Li-huaa,b, LI Guo-yuana,b, XU Dong-shenga,b, WANG You-ninga,b, ZHANG Ai-quna,b, ZOU Li-pinga,b (a. Hubei Key Laboratory of Quality Control of Special Fruits and Vegetables; b. College of Life Science and Technology, Hubei Engineering University, Xiaogan 432000, Hubei, China) Abstract: To define species and diversity of Castanea mollissima seed rot pathogens in Xiaogan, ITS in 11 strains isolated from the local area were analyzed by sequencing and