红松SSR-PCR反应体系的建立与优化 Establishment and optimization of the SSR-PCR reaction system in Pinus koraiensis Sieb.et Zucc..pdfVIP

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2018-01-30 发布于上海
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红松SSR-PCR反应体系的建立与优化 Establishment and optimization of the SSR-PCR reaction system in Pinus koraiensis Sieb.et Zucc..pdf

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红松SSR-PCR反应体系的建立与优化 Establishment and optimization of the SSR-PCR reaction system in Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.

第28卷第1期经济林研究 VoI．28No．1 2010年3月 NonwoodForestResearch Mar．2010 红松SSR—PCR反应体系的建立与优化冯富娟18，赵丹仲，孙晓艳h，韩士杰2，许小妍h (1．东北林业大学a．生命科学学院；b．林学院，黑龙江哈尔滨150040； 2．中国科学院沈阳应用生态研究所，辽宁沈阳110016) 摘要：为了建立红松SSR—PCR最佳反应体系，以CTAB法提取的红松针叶DNA为模板，应用单因子试验及L。。影响，并对延伸时间。热循环参数进行了探讨，建立了稳定的、可重复的红松SSR—PCR最佳反应体系及PCR扩增参 XPCRbuffer mmol／L，数。结果表明，PCR的最佳反应体系为：10L体系中，I 1肛L、DNA模板50～120ng，M92+3 dNTP0．4mmol／L，引物0．5弘mol／L，Taq酶0．75U。利用该体系筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物13 对。在此反应体系下，所扩增谱带清晰、稳定、多态性高。关键词：红松)SSR；优化；正交设计；单因子试验中图分类号：Q75；$791．247文献标志码：A Establishmentand oftheSSR—PCRreaction optimization in Sieb．et PinuskoraiensisZucc． system FENG Danl“，SUN Fu—juanl。，ZHAO Xiao—yanl4，HANShi—jie2。XUXiao—yanl‘ (1．a．Schooloflifescience；b．Schoolof Forestry，NortheastForestryUniversity，Harbin 2．Instituteof of Applied AcademySciences，Shenyang Ecology，Chinese 110016，Liaoning，China) in from Abstract：InordertOestablishthe SSR—PCRreaction Pinus DNAextracted optimal system koraiensis，taking needleas effectsofconcentrationsof and on template。the templateDNA，Mg“，dNTPs，primerTaqpolymerase and test SSR—PCR were themethodofCTAB factortest ofL16(45)， amplificationanalyzedby usingsingle