高中生物实验复习专题——实验一 提取、分离、鉴定类实验.docVIP

实验一 提取、分离、鉴定类实验专题 一、实验原理及重要实验步骤 实验一：检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 （一）、还原糖的检测和观察 1、实验原理 还原糖（常见的有 、 、 等）与 （试剂）在 （条件），生成 沉淀。 2、斐林试剂的使用 （1）斐林试剂甲液—— 斐林试剂乙液—— （2） （橙黄色） 最快（溶解度 ） （黄 色） （蓝绿色） 最宽（含量 ） （黄绿色） 最慢（溶解度 ） 实验三：DNA的粗提取与鉴定 1、提取DNA的方法 （1）DNA的溶解性: DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 此外，DNA不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 (2）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性: 蛋白酶能水解 ，但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但对DNA没有影响。 (3）DNA的鉴定: 在 条件下，DNA遇 会被染成 色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。 2、实验设计 （1）实验材料的选取：使用富含 的生物组织，成功的可能性更大。 （2）破碎细胞，获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用 搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用 溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的 和 ，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 （3）去除滤液中的杂质 （4）DNA的析出与鉴定 实验四：血红蛋白的提取和分离1．在还原性糖的鉴定实验中，对斐林试剂的叙述，错误的是 （ ） A．可直接滴加在苹果的切面上 B．最好是刚配制的 C．由甲液和乙液两种组成 D．使用时，必须混合均匀 2. ①葡萄糖? ②果糖? ③蔗糖 ? ④纤维素? ⑤淀粉?? A．①②??????? 　B．③④????????? 　C．⑤⑥??????? 　 D．①②④ 3.某同学在显微镜下观察花生子叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞较清晰另一部分较模糊，这是由于（ ） A．反光镜未调节好 B．标本切的厚薄不均 C．细准焦螺旋未调节好 D．显微镜物镜损坏 4.对生物组织蛋白质鉴定实验的叙述，错误的是（ ） A．用现成的食用豆浆代替研磨制备的生物组织样液 B．用鸡蛋蛋白作材料必须用水加以稀释 C．将双缩脲试剂A和B同时加入盛有黄豆组织样液或蛋白质稀释液的试管中，摇匀观察 D．制备黄豆组织样液时，要加少许SiO2 ．.某同学在做色素分离实验时，滤纸条的色素有重叠现象，其原因可能是 A．滤液过少 B．层析液没及滤液细线 C．层析液过少 D．滤纸条没经干燥处理 7.对“绿叶中色素的提取和分离”实验，下列描述正确的是 A．将5g新鲜完整的菠菜叶，放入研钵中，加入无水乙醇．石英砂．CaCO2以后，迅速研磨 B．用毛细管吸少量滤液，沿铅笔线处小心均匀地画出一条滤液细线，并连续迅速地重复2－3次 C．把画好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散 D．色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中加入无水乙醇是为了溶解色素 8.分别在三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按右表添加试剂。经研磨、过滤得到三种溶液：深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。经①、②、③过程处理得到的溶液的颜色依次是（注：“+”表示加，“-”表示不加） 处理 ① ② ③ 石英砂（少量） ＋ ＋ ＋ 碳酸钙（少量） － ＋ ＋ 95%乙醇（10毫升） ＋ － ＋ 蒸馏水（10毫升） － ＋ － A．深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色