病毒感染恒河猴的研究.pdfVIP

维普资讯 1． i900 Sini~it 单克隆抗体治疗 日本脑炎 病毒感染恒河猴的实验研究 张明杰 汪美先 姜绍谆 马文煜 于碧云 (第 四军医大学微生蜘学教研室， 安 711)¨32) 提 要 感染 日本脑炎病毒 (jEV)的恒河猴 ，出现猗炎的一系列症状与体征 ，终 园呼吸 及 循 环衰竭而死亡 。JEV感染猴体 温升到超过39℃ 以上后 的第 2天，注射单克隆抗体 (McAb) 制 剂进 实验性治疗 。结果显 示 ，McAb经肌 肉、静脉 、硬脑膜下加肌 肉等不 同途 径注射 后，均有 良好的疗效，对 垣河猴的保护率达1O0舾，其中以硬腱下加肌 肉途径 庄1 射 McAb 的效果最佳 。 多次注射 MeAb ，未发现任何不 良反应与毒副作用 。本研究表 明， 将 鼠源 性 McAb用于曼长娄安全可靠，若过渡到临床使用，是可行的。 关键词 ：恒河猴 日本脑炎 单克隆抗体 在用 JEV MeAb对感染 JEV的小 白鼠厦幼 山羊实验性治疗取得 良好效 果… 的基础 上，为了进一步证明用M。Ab蝤 目查笋炎的有效性，了解将鼠源性Mc 用于异种的安 全性 ，探索应用McAb进行临床治疗的可能性，选择 JEV感染的灵长类动物——恒河 猴进行 McAb治疗 日本脑炎的临床前观察。 、 材 料 与 方 法 一 、 病毒 ：JEV SA1株，为本室分离保存，在 乳鼠脑 内连续传三代增毒，并按 常规法滴定其 对Ca／36白垃伊蚊 细胞的TCID50为l×1 ／m1分装后 一20℃保存备用。 =、恒河鬃：约3岁，4kg，捕 自． 山区的雌性恒河猴，在 本校实验 动物研究 中心检疫观察 一 周，经血凝 抑制试验 【1证实 ，血液及脑脊髓液 中的 JEV抗体均为 阴性。 三 、恒河臻感染：背部皮下往射l×lO。～ TC1D6D的 JEV SAl‘株氨脑 悬液1．0ml 四、单克瞳抗体制剂 的制备：在用液体石蜡预处理的 Balb／c小鼠腹腔接种 2HI，2F2及mC3 杂交寤细胞 l引 ，制各腹水型 McAb。上述三种腹水等量混合后 ，N4S~,饱和的硫酸铵沉淀一扶 ，再 经 DEAE—Sephadex A50(pharmaee1)离子交换 分析 提取 lgG，S6℃处~30rain，以 1mg／ml的浓 度分装 ，一70℃保存 l1 五、单克瞳抗体制荆 的安全试验：按美国药品生物制 品研 究和检查 中心办公室(OBRR,FDA) 对 翩备适合人体 内注射用 MeAb制剂的耍求 【1进行，台格者方可作为治疗甩 McAb制剂 六、治疗试 睦：病毒感染猴体 温升到超过39C以后的第 二天 ，注射 McAb翩 剂 5mg。注射途径 本文于1989年 1月1P日收到 维普资讯 稍毒攀帮志 l，1日0o 5 V irol。gi~t Sialc● 斯静膳 肌 肉、．硬脯馕 下抽赧L冉三种。窘毒对腻组注射生理盐nk．SmI。 七、慑河矗血j童叠■■t麓中簟童囊蟛蜘以罨矗：栗甩捷避ELISA疵抗体阔擅夹心洼f耵． 儿 慑阿曩血穰爰奠誊鼍渍中抗JEV抗体曩薹竞瘴鼍奋囊鲁蔫：采用快港抗俸捕捏ELISA ‘¨， 瑟快速免疫复台物捕捉 ELISAI¨。槛包抗体为 兔疰抗 猴 IBM 及 IgGIo1。 九、慑河囊曩t栋j基的槛嗣：硬脑鹏下加肌肉治疗组的 只恒 可