核酸荧光染色技术应用.pptVIP

血常规检查中的误差分析及核酸荧光染色技术的应用 希森美康公司 马文新 血常规实验中误差来源 不同生理状态 仪器运行状态 配套试剂 样品处理 特殊病例 特殊病例所致白细胞测定误差 白细胞假性升高 特殊病例所致血红蛋白质假性升高 乳糜标本(高脂血症) 高胆红素血症 WBC异常高值标本(白血病等) 功能进展的两大趋势 完善对成熟细胞的检测性能 白细胞：五分类/ EO/ BA 血小板：PLT方法学 发展不成熟细胞的检测功能 白细胞类：IG/ HPC 红细胞类： NRBC / RET/ RET分类 产品进展 白细胞二分类仪器：F800/F820 白细胞三分类仪器：KX21, K4500, pocH 白细胞五分类仪器 多通道阻抗法：SE9000 激光染色法：SF3000 核酸荧光染色法：XE2100, XT1800i/XT2000i 模块式自动化-5分类+推/ 染片机+读片机 XE-alpha 五分类血液分析仪检测技术 方法学进展 物理法 激光、射频、电阻 细胞化学 染色 物理 + 细胞化学 Sysmex专利技术： 核酸荧光染色+半导体流式细胞分析 白细胞五项分类技术进展 第三代物理光源 半导体激光。 大幅度提升实用性能 寿命长：7 - 10年 体积小 启动快 电耗小 对稳压要求低 更为经济 白细胞五项分类技术进展 细胞化学技术：核酸荧光染色 区别于酸碱染色、酶染色、糖原染色 不同细胞亚群、不同成熟阶段，表现不同的着色性 核酸的含量 核酸的结构 DNA/RNA的比例 核酸荧光荧光物质: Auramine-O 核酸荧光染色物质: Polymethine 与半导体激光有很好的适配性，633nm激发荧光 核酸荧光染色对白细胞检测的意义 更准确的WBC分类结果，排除干扰因素 IG：准确检测未成熟粒细胞 OTHER：提供异常淋巴、原粒细胞信息 核酸染色下的异常细胞信息 电阻抗检测原理与三分类 核酸荧光染色与半导体激光流式细胞技术 激光流式细胞检测原理与五分类 双角度散射光 DIFF通道细胞形态变化 Baso通道细胞形态变化 荧光信号分析的特异性 正常细胞信息的二维定位 SLS血红蛋白分析 SLS血红蛋白法 血红蛋白转化速度快 无氰污染 能准确测量高铁血红蛋白标本(如质控标本) 血小板计数技术进展 电阻法 检测数目多，重复性好；稳定；经济 不能形态分辨，混淆小红细胞、细胞碎片和大血小板 激光法 能一定程度上分辨形态 提高线性 核酸荧光染色染色+激光法 形态分辨能力进一步提高 提高线性 实用性能增强 血小板计数双方法 巨大血小板的检测 巨大血小板的检测 巨大血小板的检测 有核红细胞分析 NRBC单独检测计数,提升仪器的检测能力 自动从白细胞中扣除NRBC，得到更准确的白细胞计数和分类结果 不断创新的产品！ Sysmex血液分析产品概况 XE-2100的位置 HPC检测 造血干细胞与HPC参数 造血干细胞与HPC参数 HPC检测 XE/XT检测功能比较 RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDW 2.23 144 0.249 111.7 64.6 578 0.254 ×1012/L g/L fL pg g/L RU* RU* RU* RU* RU* * 红细胞凝集 RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDW 4.35 145 0.435 100.0 33.3 333 0.147 ×1012/L g/L fL pg g/L 加温30分钟后红细胞凝集解离 加温到37OC后在测定 自我免疫所造成的红细胞凝集 离心后血浆部分用生理盐水置换 冷凝集素所造成的红细胞凝集 红细胞凝集的解离 高血糖（600mg/dl）、高血脂、高血钠、高尿素氮，如高钠性脱水、严重尿毒症、糖尿病、静脉输注葡萄糖、标本采集错误。 葡萄糖 水分子 血中 稀释液中 高渗状态对MCV的影响 高糖对MCV的影响 RBC数假性低值，MCV高值 红细胞凝集 RBC 3.74x1012/l HGB 11.8g/dl HCT 38.5% MCV 102.9fl MCHC 30.6g/dl WBC 800x109/l 小淋巴细胞大量出现 盔形红细胞综合症-血流障碍 小血管障碍性溶血性贫血 大血管障碍性溶血性贫血 烧伤引起的溶血性贫血 行军性血红蛋白尿症-行军、马拉松、空手道等 细胞骨格 破碎红细胞的出现 破碎白细胞的出现 用XE、XT 、 R系列仪器测定 用目视法测定 AML、淋巴瘤、严重感染、化疗等 重新采血 血小板凝集 冷凝集素所造成的血小板凝集 加温到37OC后再测定 起因于EDTA盐，特别易 附着于中性粒细胞的周围 血小板卫星现象(Platelet Satellism) 电阻