复制缺陷型腺病毒载体介导的VEGF基因治疗大鼠缺血皮瓣的实验研究.pdfVIP

·302 · 安徽医科大学学报 Acta Uniuersitatis Medicinalis Anhui 2005 Aug ；40 （4 ） 复制缺陷型腺病毒载体介导的VEGF 基因 治疗大鼠缺血皮瓣的实验研究 王 伟 汪春兰 赵 宇 曹东升 王帮河 丁 浩 王新宇 朱华锋 摘要 目的 探讨局部应用以复制缺陷型腺病毒为载体的 分别为Ad-VEGFl65cDNA 目的基因组、Ad-GFP 基 血管内皮生长因子（Ad-VEGFl65cDNA ）基因治疗对大鼠随 因对照组、磷酸盐缓冲液空白对照组，以标准鼠全价 意缺血皮瓣生存的影响。方法 选用30 只SD 大鼠，体重 饲料分笼喂养7 d ，室温控制在25C 左右，使其适应 350 ~ 400 g ，随机分成三组，在其背部形成8 cm X 2 cm 的全 实验环境。经腹腔注射2. 5% 苯巴比妥钠（25 mg/ 厚随意型皮瓣。于皮瓣远端真皮 下分别注射 Ad- kg ）麻醉。行俯卧位固定，使用8% 硫化钠背部脱 VEGFl65cDNA（l0 只目的基因组）、Ad-GFP （l0 只绿色荧光 毛。于大鼠背部正中设计蒂在尾侧髂脊水平随意皮 蛋白基因对照组）、 PBS （l0 只磷酸盐缓冲液空白对照组）。 瓣，皮瓣长宽为8 cm X 2 cm 。 48 1 后按原设计掀起皮瓣并原位缝合，术后7d ，测量皮瓣的 1. 1. 1 活体基因导入皮下 治疗组每个皮瓣真皮 成活面积，并采集组织行免疫组化、组织学检查等。结果 皮瓣成活率：Ad-VEGFl65cDNA 组为（74. 382 1 l. 338 ）% ， 下注入 l08 pfu 重组复制缺陷型腺病毒载体介导 Ad-GFP 组为（52. 246 1 l. 663 ）% ，PBS 组为（52. 87 l 1 VEGFl65cDNA ，病毒用PBS 稀释至总量l ml ，用25 2. 890 ）% ，Ad-VEGFl65cDNA 组与其他两组间差异有显著性 g（l ml ）注射针在设计皮瓣远端2/ 3 处分l0 点注入 （P 0. 0l），免疫组化显示基因转染组毛细血管周围VEGF 真皮下，每点0. l ml 。对照组同样方法注入l08 pfu 沉积，其微血管密度明显高于对照组。结论 局部皮下注射 重组复制缺陷腺病毒载体介导的GFP l ml ，空白组 Ad-VEGFl65cDNA ，可诱导局部 VEGF 蛋白表达，促进新生 注入PBS l ml （Ad-VEGFl65cDNA ，Ad-GFP 为安徽 血管的形成，提高缺血皮瓣的成活面积，是一种简单有效的 医科大学第一附属医院整形外科王帮河硕士包 基因治疗方法。 装）。 主题词 内皮生长因子/ 遗传学；腺病毒科；基因表达；外科 1. 1. 2 皮瓣缺血模型建立 48 1 后重新麻醉，术野 皮瓣 碘伏消毒，铺巾后，沿皮瓣设计线切开皮肤，分离皮 中图分类号 R373. 7 ；R394 ；R 446. 6 下至筋膜层，于筋膜下钝性分离至皮瓣蒂部，掀起皮 文献标识码 A 文章编号 l000 - l492（2005 ）04 - 0302 - 03 瓣，止血后5-0 丝线原位缝合，保证皮肤对合良好。 皮瓣移植是皮肤缺损创面覆盖的主要手段，而 术后大鼠用消毒好的单笼饲养l 周。 皮瓣缺血性坏死一直是困扰整形外