复制缺陷性腺病毒联合氮烯咪胺对黑素瘤细胞凋亡的调控作用.pdfVIP

生堡塞堕处程苤壹踅!Q生!旦蕴21鲞笠!翅￡垡!』兰!P§竖：叁!魁!!垫!Q：!垡：堑：№：§ ·1077· ·实验研究· 复制缺陷性腺病毒联合氮烯咪胺对黑素瘤 细胞凋亡的调控作用 蒋冠郑骏年魏志平 裴冬生毛立军刘彦群 【摘要】 目的观察荷载黑素瘤分化相关基因-7(mda-7)的复制缺陷性腺病毒Ad．mda-7联合 氮烯咪胺(DTIC)对黑素瘤M14细胞的诱导凋亡作用。方法将M14细胞分为4组进行干预，分别 为PBS组、DTIC组、Ad．mda-7组、Ad．mda-7联合DTIC组。应用CCK-8法检测细胞抑制率；应用结 晶紫法检测细胞毒性；应用ArmexinV法检测细胞凋亡率；应用Westernblot法检测mda-7蛋白及 MOI+10 bax、bcl．xL、Mcl．1、Caspase-9、Caspase-3凋亡相关蛋白表达。结果CCK-8法显示10mg／L 的Ad．mda-7联合DTIC干预M14细胞48h后抑制率为(73．56±2．58)％，与对应剂量的Ad-mda-7 (32．30±2．38)％、DTIC(15．754-3．21)％比较，差异有统计学意义(P0．05)；结晶紫法结果表明 Ad．mda-7联合IYHC较Ad-mda-7、DTIC对M14细胞有显著的细胞毒性效应；AnnexinV法显示10 MOI+10 mg／L的Ad-mda-7联合DTIC干预M14细胞48h后凋亡率为(71．474-3．57)％，与对应剂 ern blot结果表明Ad．mda-7联合DTIC作用的M14细胞能高效表达mda-7，同时bax的表达增加， Mcl一1、bcl—xL的表达降低。Caspase-9、Caspase-3被裂解活化。结论荷载mda-7基因的复制缺陷性 腺病毒Ad．mda-7联合化疗药物DTIC有明显的协同诱导黑素瘤细胞凋亡的作用。 【关键词】腺病毒载体；mda-7；氮烯咪胺；黑素瘤 adenovi川sincombinationwithDacarbazineresultsinenhancedmelanoma Replication-defective cells JlANGGuan‘，zHENcJun—nian，WEl apoptosis Zhi-ping，PElDol唱一sheng。MAOU-jun。LlU XuzhouMedical ofDermatology，AffiliatedHospitalof College，Xttzhou221002， Yan—qun．‘Department China author：HU CorrespondingYan—qun．Email：5721268@163．com Toobservetheeffectsofthecombineduseof adenovi． 【Abstract】objective replication．defective rus the ofamelanonlacellhneM14． carryingmda-7(Ad．mda-7)withDacarbazine(D1rIC)onapoptosis MethodsM14cellsweredividedinto4groups：PBSgroup，DTICgroup，Ad-mda-7group，Ad-mda-7 wagassessedCCK-8 DTIC rateofcells effectand plus group．Theinhibitory by assay．Cellcytotoxic apop- tosiswerede