培养方法——二步培养法 细胞生长与次生物质的产生对培养基与培养条件的要求不同,因而在细胞工厂化培养中采用二步培养方法,既使细胞生长快,又使次生物质代谢多。 第一步,促进细胞分裂,解决生物量生产问题; 第二步,促进次生代谢物合成,解决次生物质的积累问题。 在细胞指数生长停止期前后才更换培养基,有利于次生物质的积累。(一部分细胞用于提取物质,另一部分用于继续培养,进行下一个细胞周期) 培养方法—— 二步培养法 提高有用物质生产效率的技术因素 ①细胞株系生物合成能力 以特异的器官为材料 筛选生物合成能力强的细胞株 Wayner等用柠檬叶、鸡眼藤的培养物,经过筛选细胞株系,其次生代谢物是该植物完整植株的10倍。Zenk从长春花的培养物中,筛选出高产细胞株系,其生产根碱和阿玛碱的总量,比亲本植物高1.5倍,是亲本植物根含量的5倍。 ②培养基中添加前体 前体:有用次生代谢物的前驱物。 烟草愈伤组织培养中,将前体物质—烟碱酸加入,会增加烟碱的生成量。 (前体物质的加入时间非常重要,应注意。) ③培养基中生长调节剂(激素)的作用 植物生长调节剂不仅影响植物的脱分化与再分化,而且能影响次生代谢物质的产生。如烟草愈伤组织培养中,培养基中添加吲哚乙酸(IAA),
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