[理学]纤维素酶产生菌的筛选分离.docVIP

纤维素酶产生菌的筛选分离 实验目的： 掌握无菌操作的技术 掌握选择培养基的设计和配制 掌握特定菌种筛选方法 掌握菌种鉴定方法 测定菌种生长曲线和纤维素酶的活性 实验原理： 该研究设计性实验是利用纤维素酶产生菌可以分解纤维素酶，故而在含有羧甲基纤维素的平板（pH9.0）上可形成透明圈的原理和筛选纤维素酶产生菌。 实验内容： 培养基 选择培养基的配制 同体培养基： 250mL三角瓶、1.8g营养肉汤、100mL水、pH9.0、2g CNC-Na、2g琼脂、搅拌均匀包扎灭菌 液体培养基： 250mL三角瓶、1.8g营养肉汤、100mL水、pH9.0、2g CNC-Na、2g琼脂、搅拌均匀包扎灭菌（配制2份备用） 摇瓶发酵培养基的配制 蛋白胨1.0%、酵母粉1.0%、CMC-Na1.0%、NaCL0.5%、KH2PO4 0.1%，另配10% NaCO3，分开灭菌后与上述培养基成分按1:9的比例混合均匀，使培养基的初始PH为9.5-10 （2）配制筛选平板和斜面培养基 在超净台中将上述培养基倒入平板和试管，试管倾斜放置，待培养基凝固后，低温保存，待用。 （3）菌种筛选 ①称取土样10g，用无菌水稀释定容至100mL，将土壤液稀释至 移取150mL土壤悬液到筛选平板A，均匀涂布后于30。C恒温培养箱培养12h. ②待平板A长出单菌落后，用接种环挑取每个单菌落的一半到另一筛选平板C上，作染色