血小板抗原抗体检测及其临床应用(检验科) -.ppt

每一个标本使用三条试剂，一条用于免疫复合物机制，两条用于半抗原机制。 浓度1 浓度2 浓度3 浓度1 浓度2 浓度3 PC NC 免疫复合物机制 半抗原机制 对 照 标 本 阳 性 对 照 阴 性 对 照 检 测 标 本 药物性抗体检测 操作步骤：免疫复合物机制 1. 将血小板包被在微孔板上，洗板3次 2. 加入两滴低离子强度溶液 3. 加入两滴已加入不同浓度药物的待检标本（同时加入不添 加药物的待检标本作为对照） 4. 向阳性对照、阴性对照对照孔中分别加入试剂盒中的阳性 对照、阴性对照 5. 37℃气育45分钟 6. 洗板5次 7. 立即加入抗人IgG及指示红细胞，混匀 8. 离心，观察结果 药物性抗体检测 操作步骤：半抗原机制 1. 将血小板包被在微孔板上，洗板3次 2. 加入两滴低离子强度溶液 3. 加入三滴已加入不同浓度药物的BSA溶液 4. 37℃气育30分钟 5. 洗板3次 6. 向相应孔中加入两滴低离子强度溶液，待检标本、对照表本；阳性对照、阴性对照对照孔中分别加入试剂盒中的阳性对照、阴性对照（每种药物浓度均做阳性对照、 阴性对照） 7. 37℃气育45分钟 8. 洗板5次 9. 立即加入抗人IgG及指示红细胞，混匀 10. 离心，观察结果 药物性抗体检测 总 结 1.血小板表面有复杂的抗原系统，能够刺激机体产生相应的抗体，导致自身免疫性疾病、不良输血反应、NAIT、流产等疾病。 2.血小板抗体检测对评估常规输血中非溶血性输血反应发生的风险，保障输血安全具有重要意义，同时可响应国家精准输血的号召，节约血液资源，合理控费。 3. 血小板抗体检测对诊断NAIT、评估胎母血小板血型不合导致的流产、死胎风险有重要意义。 模板来自于 / * * * 母体血清抗HPA抗体检测，然而母体抗体水平到预产期时逐渐下降，约有30%的病例抗体阴性。 父母双亲的HPA基因检测，在高加索地区采取对其HPA-1和HPA-5基因检测，而在亚洲地区应考虑进行HPA-4和HPA-5基因检测。 父母双亲交叉配型实验，将母体血清与父亲血小板进行交叉配型实验，即使不能确切知道不相合的抗原，但这种方法也能发现母体是否存在血小板同种异体免疫反应。 NAIT早期诊断与筛查 NAIT NAIT 血小板抗体检测常用方法 功能性试验 酶标法 荧光法 固相凝集法 应用范围 抗体检测 √ √ √ √ 交叉配型 √ √ √ 性能 灵敏度 低 高 极高 高 特异性 不好 好 一般 较好 反应时间 长 ＞2h ＞2h ＜1h 所用仪器 不定 酶标仪 荧光显微镜 或流式细胞仪 全自动设备，半自动设备 16th版AABB评价 未提及 特异性鉴定的可靠方法 敏感性高 特异性不足 血小板交叉配型应用最为广泛的方法 方法 指标 血小板抗体检测方法-固相凝集法 血小板抗体筛检，包括HLA抗体、HPA抗体及其它血小板反应性抗体。辅助血小板相关免疫性疾病的诊断。 患者自身抗体检测，包括血小板结合抗体和血清中游离抗体。检测血小板结合抗体可将患者血小板平铺在反应孔后，直接加入抗人IgG和指示红细胞进行检测。血清中的游离抗体可通过患者自身血小板和血清反应来检测。 用途： 血小板抗体检测方法-固相凝集法 1.主要应用科室：检验科，血液病科，妇产科，新生儿科。 2.检验科： 检验科在常规血型鉴定中加入血小板抗体检测，可对临床输血中出现发热、黄疸、急性肺损伤等非溶血性输血反应的风险作出评估。 血小板抗体检测临床意义 3.妇产科:孕前，孕期，产后 1).反复流产、不孕不育查因：对于反复和习惯性流产史（尤其是孕早期）和不孕不育史的患者，检测患者血清和血浆中血小板抗体的水平，可对其造成流产和不孕不育的原因作出辅助诊断。 2).产检（尤其针对高龄和二胎产妇） 孕早期检测：在孕早期（三个月）产检中常规检测母亲与胎儿的血小板相容性，对于孕早期出现流产和死胎的风险评价具有非常重要的意义 孕晚期检测：在孕晚期（胎儿出生前）检测母体血清或血浆中血小板抗体水平，对胎儿出生后罹患新生儿血小板同种免疫性疾病风险评价具有非常重要的意义。 3).妊娠期血小板降低的查因：孕妇在妊娠期血小板减少是一种常见现象，如是生理性降低则危害不大，往往生产后会恢复正常。但如果血小板的降低是由于孕妇自身免疫性疾病引起的则会引起流产、死胎、以及新生儿相关的血小板减少性疾病，危害严重。 血小板抗体检测临床意义 4.血液病科： 1）自身免疫性疾病的辅助诊断：检测患者血清和血浆中自身血小板抗体的水平和特异性，可辅助诊断自身免疫性疾病如白血病、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、血小板减少症、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、特发性血小板减少性紫癜等。 2）药物性抗体的检测：某些药物的存在如