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生物芯片技术及临床应用 一、生物芯片的技术背景与发展前景 生物芯片技术是当代生物技术的重大变革 ！ 生物芯片技术始于20世纪80年代后期 其概念源于计算机芯片 其成熟标志为全球掀起的生物芯片产业化热潮！ 生物芯片技术的应用领域 随着后基因组计划和生物信息论的发展，确定了人体功能是许多大分子蛋白、小分子细胞因子、及信号转导因子相互作用、相互调节的结果，疾病也是如此。 原有的测定方法已不能满足快速处理如此大量的疾病相关信息的需要，因此人们致力于发展简便、快速、小型、廉价的生物检测技术。 蛋白芯片 目前临床上首先开发的是中低密度蛋白芯片。蛋白芯片严格的说仍属于血清学方法，但由于生物芯片技术本身具有的突出优点，使此技术呈现出广阔的科学前景和良好的临床需求。 蛋白芯片微矩阵根据需要设计为不同的样品，体现芯片的高通量特性。 层析动力学反应 芯片 VS ELISA 的优势 多项联检 单人份操作 操作简单工作量少 时间短 自带标准曲线 反射光，可减掉背景噪音 自动化读数 无污染 一次检测一项 多人份操作 稀释样本 操作步骤多，耗时多 操作干扰大 自定标准值 透射光，需要质控品对照 人工转化结果数据 生物芯片的种类 生物芯片：是一种高度集成的平行化处理生物信息的指甲盖大小的薄片。 依据芯片上固定的探针不同，可分为三类。 核酸芯片 蛋白芯片 组织芯片 蛋白芯片与传统检验方法比较 与传统方法比较具有以下优点： 取样方便、操作简单、灵活性高、特异性强、 多指标、高通量、时间短以及立等可取！ 生物芯片诊断系统： 包括三大部分： 1、生物芯片 2、生物芯片阅读仪 3、生物芯片分析软件 二、生物芯片技术在临床中的应用 蛋白芯片临床应用： 幽门螺杆菌抗体谱检测芯片 呼吸道病毒感染抗体谱检测芯片 幽门螺杆菌HP抗体谱检测芯片 尿素酶（Ure）IgG 细胞毒素相关蛋白A（CagA）IgG 细胞空泡毒素A蛋白（VacA）IgG 热休克蛋白60（Hsp60）IgG 硝基还原酶(RdxA) IgG 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，HP) 寄居在胃幽门附近胃窦黏膜上的革兰氏阴性杆菌。 HP能分泌的尿素酶，分解尿素生成氨和CO2。氨在HP周围形成“氨云”中和胃酸，对HP起保护作用不被胃酸杀灭，HP还能产生热休克蛋白以保护自身蛋白不被胃酸破坏。 HP产生的各种保护性酶或蛋白对胃黏膜造成损害，HP的DNA可整合入宿主DNA引起转化，导致胃黏膜的癌变。 2005年的诺贝尔生理学或医学奖授予了澳大利亚科学家沃伦和马歇尔。因为他们发现了导致胃炎和胃溃疡的细菌——幽门螺旋杆菌。 HP的生物学特性 HP 菌株毒力不同。 可释放空泡毒素（VacA）和细胞毒素相关蛋白A（CagA）的菌株，这种HP被称为产毒型HP。致病力更强! HP与疾病的关系 幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎的主要原因，是慢性萎缩性胃炎和胃溃疡的重要元凶，与胃癌发生关系密切，已被世界卫生组织（WHO）列为胃癌的第一类致癌因子。 近年研究表明，幽门螺杆菌还是心血管疾病、糖尿病等疾病的致病因子。 近年来，儿科门诊发现不少儿童患慢性胃炎的病例，往往由于被妈妈认为肚里有寄生虫而耽误了治疗。儿童患慢性胃炎有逐年增多的趋势，尤其是3－6岁的学龄前儿童。针对儿童及家庭预防和根治幽门螺杆菌感染不仅对胃部疾病而且对胃部以外的疾病的预防和治疗有非常重要的意义。 医学专家认为对幽门螺杆菌感染的早期发现和及时治疗是防治慢性萎缩性胃炎、胃癌的关键环节！ 第三次全国幽门螺杆菌感染若干问题共识报告(2007.8庐山会议) Hp感染的诊断方法 侵入性方法，依赖于胃镜活检。 快速尿素酶试验(RUT)、直接涂片染色镜检、组织切片染色镜检、细菌培养、基因检测方法(如PCR、寡核苷酸探针杂交等)、免疫检测尿素酶 (IRUT)。 内镜与活检钳消毒不严格可造成医源感染。 非侵入性检测方法，不依赖内镜检查。 13C或14C尿素呼气试验(UBT)、15Ｎ尿氨排泄试验、粪便HP抗原检测、血清及分泌物抗体检测以及基因芯片和蛋白芯片检测等。病人依从性较好。 第三次全国幽门螺杆菌感染若干问题共识报告(2007.8庐山会议) HP感染的诊断标准 以下方法检查结果阳性者可诊断HP现症感染： ① 胃黏膜组织R