[农学]《分子遗传学设备使用及实验技能》医学遗传学实验技术手册.ppt

《实验室常用仪器使用及管理》医学遗传学实验技术手册 黄承滨 第一章 容器、器械 一、容器 ㈠ 清洗液的配置 ㈡ 玻璃器皿的处理及烘干、高压灭菌（853 洗涤法） ㈢ 橡胶类制品的处理 ㈣ 手术器械的处理 ㈤ 载玻片及盖玻片器的处理 ㈥ 急用容器的应急方案 ㈠ 清洗液的配置： ⑴ 清洗液的配制方法： ★特别说明：在耐热、耐酸的非金属容器（容器容量要大于,需配置清洗液总量的一倍,这样可以防止酸液迸溅到容器外）,现将称好的重铬酸钾道入相对应量的自来水中,再缓缓加入相对应量浓硫酸,并用玻璃搅拌棒不停的搅拌,直至重铬酸钾全部融解。操作时要戴耐酸手套及胶皮围裙,防止清洗液迸溅到手及衣服上 ⑵ 清洗液配方：清洗液常用的有两种,它是根据玻璃器皿的污净程度选用之； ① 强液： 重铬酸钾 120g 浓硫酸(98％) 比重1.834 160ml 自来水 1000ml ② 弱液： 重铬酸钾 50g 浓硫酸(98％)比重1.834 90ml 自来水 1000ml ③ 中液： 如需要介于强液与弱液之间的配方：可取三种试剂的平均值,即为中液 注： 如果清洗液经使用变色为黑绿 色时，表明清洗液已经失效，需重 新配置。在挟持器皿时，忌用金属 工具，以免腐蚀。 ㈡．玻璃器皿的处理及烘干、高压灭菌（853洗涤法） ⑴ 先用自来水将玻璃器皿洗去脏物,再用洗涤剂煮沸30分钟,趁热刷洗干净（或用超声波清洗机用洗涤剂清洗）; ⑵ 将玻璃器皿内的洗涤剂充分洗去,再将玻璃器皿置于装有自来水的容器内,要将玻璃器皿的空气排净,并流水冲洗30分钟（洗涤剂会影响细胞生长）； ⑶ 将玻璃器皿洗净、空干（约24时）； ⑷ 将空干的玻璃器皿，置于装有清洗液的容器内，要将玻璃器皿的空气排净，使玻璃器皿装满清洗液，浸泡48小时（有磨口的玻璃器皿：如玻璃注射器，磨口瓶等，免于浸泡清洗液这一步）； ⑸ 将玻璃器皿从清洗液中取出，用自来水充分冲洗8次，并流水冲洗30分钟后，将玻璃器皿置于装有蒸馏水的容器内，要将玻璃器皿的空气排净，使玻璃器皿装满蒸馏水，浸泡48小时，使清洗液的酸性物质完全去掉; ⑹ 将玻璃器皿再用蒸馏水、双蒸水分别冲洗5次和3次； ⑺ 烘干、高压灭菌： ① 将洗净的玻璃器皿，倒置于80℃的烤箱内，烘干； ② 如果是无菌室内，要用的玻璃器皿，则用（纱布包好脱脂棉制好的）棉塞塞紧器皿口，再用硫酸纸及牛皮纸包好并扎好（玻璃注射器要放入上下垫有纱布的饭盒内,并将注射器桶和芯分开，按对放好）,高压灭菌（15磅20分钟）； 培养瓶、移液管、离心管等要放入上下垫有纱布的搪瓷盘内，放置烤箱高热灭菌（180℃2小时）。 培养瓶、移液管、离心管等要放入上下垫有纱布的搪瓷盘内,放置烤箱高热灭菌（180℃2小时）。 ㈢. 橡胶类制品的处理 ⑴ 新橡胶制品 ①在处理新橡胶制品时： ②先用清水洗充分洗净滑石粉、杂物及泥土等, ③再用自来水水煮除去橡胶制品表面的腊（多次）, ④用1/2mol/L的NaOH 煮沸20分钟,用自来水冲洗 ⑤再用1/2mol/L的NaOH 煮沸20分钟,后用自来水冲洗,彻底冲去碱性物质, ⑥最后用蒸馏水冲洗,用双蒸水浸泡24小时,凉干,放入上下垫有纱布的饭盒内, 高压灭菌（15磅20分钟）; ⑵ 用过的橡胶制品 用后的橡胶制品立即浸泡在清水中, 用洗涤剂煮沸30分钟, 用自来水冲洗, 用蒸馏水冲洗,用双蒸水冲洗 用双蒸水浸泡24小时,凉干, 放入上下垫有纱布的饭盒内, 高压灭菌（15磅20分钟）。 ⑶ 注意事项 加热煮沸时，不要拥铝锅，而要用不锈钢锅，这样会减少金属离子量; 不锈钢锅内的水量，不要超过容量的2/3，防止液面溢出； 用电磁炉加热时，一定要用直径大于12CM的不锈钢锅（不要复合底的），不能使用搪瓷盆等底面不平的容器，最好使用定时功能； 用电炉子加热时，不要离开人，以免烧干，酿成火灾。 ㈣. 手术器械的处理 ⑴ 新手术器械： 新手术器械为了防止生锈,出厂前涂有黄油,在处理前用软纸擦去油污, 再用清水洗去污物后,加热去除油脂 再用洗涤剂煮沸2次,每次10分钟, 用自来水洗去洗涤剂残留, 用蒸馏水冲洗,用过氧乙酸浸泡24小时, 用蒸馏水冲洗,洗去酸性物质, 用双蒸水冲3次,凉干,放入上下垫有纱布的饭盒内, 高压灭菌（15磅20分钟）。 ⑵ 用后的手术器械： 用后的手术器械立即清水洗去污物, 用洗涤剂